苦地�。�紫堇靈的測定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定苦地丁中紫堇靈的含量。

本方法適用于罌粟科植物紫堇Corydalis bungeana Turcz.的干燥全草。

本品加甲醇超聲處理，放冷，補(bǔ)重，搖勻，濾過，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長289nm處檢測紫堇靈的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 甲醇

2. 0.015mol/L磷酸鹽緩沖液（pH6.7)：取磷酸二氫鉀1.58g和磷酸氫二鉀0.76g，加水1000mL溶解，混勻，用氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值至6.7。

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按紫堇靈峰計(jì)算應(yīng)不低于6000。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動相：甲醇 0.015mol/L磷酸鹽緩沖液（pH6.7)＝70 30

2.2檢測波長：289nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱定本品粉末（過三號篩)0.5g，為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取紫堇靈對照品適量，加甲醇制成每1mL含40mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品粉末（過三號篩)約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，稱定重量，浸泡1小時，超聲處理（功率250W，頻率33kHz)30分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液。

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長289nm處測定紫堇靈（C₂₁H₂₁O₅N)的峰面積，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p139。