金水寶片－腺苷的測(cè)定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定金水寶片中腺苷的含量。

本方法適用于中成藥金水寶片。

本品加稀乙醇超聲處理，放冷，用流動(dòng)相補(bǔ)重，搖勻，濾過(guò)，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)260nm處檢測(cè)腺苷的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 稀乙醇

2. 含2%四氫呋喃的磷酸緩沖溶液[0.066mol/L磷酸氫二鉀溶液-0.066mol/L磷酸氫二鈉溶液（2：3)]

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按腺苷計(jì)算應(yīng)不低于2500。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：含2%四氫呋喃的磷酸緩沖溶液[0.066mol/L磷酸氫二鉀溶液-0.066mol/L磷酸氫二鈉溶液（2：3)]

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：260nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱(chēng)取供試品

取本品20片，除去包衣，研細(xì)，取約1g，精密稱(chēng)定，為供試品。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取在105℃減壓干燥至恒重的腺苷對(duì)照品10mg，置25 mL量瓶中，用稀乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取2 mL，置100 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，制成每1mL含腺苷8mg溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品20片，除去包衣，研細(xì)，取約1g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇20mL，密塞，稱(chēng)定重量，超聲處理（功率250W，頻率33kHz)30分鐘，放冷，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液1 mL（剩余的續(xù)濾液備用)，置10 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)260nm處測(cè)定腺苷（C₁₀H₁₃N₅O₄)的峰面積，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p495。