舒胸片－人參皂苷Rg1的測定－薄層掃描法 2

本方法采用薄層掃描法測定舒胸片中人參皂苷Rg₁的含量。

本方法適用于舒胸片中人參皂苷Rg1含量的測定。

供試品于索氏提取器中加甲醇加熱回流，過濾，濾液蒸干，殘渣用甲醇溶解，制成供試液，點樣、展開，以10%硫酸乙醇溶液顯色，用薄層掃描儀進(jìn)行掃描，于波長λs=540nm， λ_R=700nm測量人參皂苷Rg₁(C₄₂H₇₂O₁₄)吸收度積分值，計算其含量。

1. 乙醚

2 .正丁醇

3 .甲醇

4 .氯仿

5 .醋酸乙酯

6 硫酸 10％硫酸乙醇溶液

7 .乙醇

1 儀器

1.1索氏提取器

1.2薄層掃描儀

1.3涂布器

應(yīng)能使吸附劑在玻璃板上手工或自動涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。

1.4點樣器

一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點樣器材。

1.5展開室

可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

2 材料

2.1玻板

用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的規(guī)格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。

2.2吸附劑

硅膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。

1. 對照品溶液的制備

精密稱取人參皂苷 Rg₁對照品適量，加甲醇制成每1mL含1.4mg的溶液，作為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取供試品10片，除去糖衣，緊密稱定，求出每片重量，研細(xì)，精密稱取約1g，置索氏提取器中，加乙醚60mL，加熱回流 2 小時，棄去乙醚液，取出濾紙筒，晾干。再置索氏提取器中，加甲醇 60mL，加熱回流至提取液無色，回收甲醇并濃縮至干，殘渣加水30mL使溶解，用水飽和的正丁醇提取5次（20mL、20mL、10mL、10mL、 10mL)，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌 2次，每次 20mL，棄去水液，正丁醇回收至干，殘渣加甲醇適量使溶解，移至 10mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

1. 薄層板制備

將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器進(jìn)行涂布（厚度為0.25～0.5mm)取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無麻點、無氣泡、無破損及污染，于110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用，或用商品預(yù)制板。

2. 點樣

精密吸取供試品溶液 6μL、對照品溶液 1μL與 4μL，分別交叉點于同一硅膠G薄層板上，如用點樣器點樣到薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點直徑一般不大于2mm，點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。

3. 展開

將點好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，以氯仿－醋酸乙酯－甲醇－水（15：40：22：10)5～10℃放置12小時的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，于105℃加熱至斑點顯色清晰，取出。

4. 含量測定

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，選擇反射方式，采用吸收法，進(jìn)行掃描，波長：λs=540nm， λ_R=700nm， 測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算。

用外標(biāo)法測定時，若對照品各數(shù)據(jù)點在校正曲線上呈一通過原點的直線時，可用一點法校正，如不通過原點通常宜采用二點法校正，必要時用多點法校正。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編、化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，一部p.636。