公開(公告)號 | CN100342007C |
公開(公告)日 | 2007.10.10 |
申請(專利)號 | CN00111627.4 |
申請日期 | 2000.01.28 |
專利名稱 | 一種新型重組葡激酶及其制備方法 |
主分類號 | C12N9/14(2006.01)I |
分類號 | C12N9/14(2006.01)I;C12N15/58(2006.01)I |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權 | |
申請(專利權)人 | 復旦大學 |
發(fā)明(設計)人 | 宋后燕;宋 鋼 |
地址 | 200032上海市醫(yī)學院路138號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構 | 上海正旦專利代理有限公司 |
代理人 | 包兆宜 |
國省代碼 | 上海;31 |
主權項 | 一種重組突變葡激酶,其特征在于改變野生型葡激酶二聚體結合面,將野生型葡激酶肽鏈的Lys109-Gly110-Phe111替換為Arg109-Gly110-Asp111,制備重組突變葡激酶。 |
摘要 | 本發(fā)明屬生物技術領域,具體涉及一種低聚合能力兼具防栓功能的新型重組葡激酶(RGD/KGD-Sak)的蛋白質結構和制備方法。根據(jù)對重組葡激酶單體、二聚體三維結構及其生化特性的分析,設計了新型葡激酶分子結構。通過PCR定點突變構建突變體RGD/KGD-Sak基因,然后與原核表達載體pLY-4重組,轉化大腸桿菌,篩選高表達工程菌。工程菌經(jīng)發(fā)酵擴增,破碎細菌,離心收集包涵體,復性后經(jīng)二步法純化RGD/KGD-Sak。所得產(chǎn)品凍干后,形成聚合體的能力顯著下降,并能顯著抑制ADP誘導的血小板的聚集,具有溶栓、防栓雙重功能。 |
國際公布 |