公開(公告)號(hào)
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CN1238382C
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公開(公告)日
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2006.01.25
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN03158299.0
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申請(qǐng)日期
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2003.09.23
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專利名稱
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中華絨螯蟹蛻皮抑制激素1蛋白
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主分類號(hào)
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C07K19/00(2006.01)I
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分類號(hào)
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C07K19/00(2006.01)I;C07K16/18(2006.01)I;A61K38/16(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P43/00(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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南京師范大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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周開亞;宋 霞;馬長艷;郭豫杰
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地址
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210097江蘇省南京市寧海路122號(hào)
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頒證日
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國際申請(qǐng)
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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南京知識(shí)律師事務(wù)所
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代理人
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胡錫瑜
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國省代碼
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江蘇;32
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主權(quán)項(xiàng)
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一種中華絨螯蟹蛻皮抑制激素1基因克隆制備的融合蛋白,其特征是以中華絨螯蟹蛻皮抑制激素1基因?qū)?yīng)于外顯子的核苷酸序列與質(zhì)粒pGEX-4T-1制備成GST-Ers-MIH1-pGEX-4T-1表達(dá)質(zhì)粒,在無NaCL的LB中30~35℃培養(yǎng)到OD600為0.5,經(jīng)IPTG誘導(dǎo),破碎細(xì)胞后經(jīng)GST親和層析柱純化,得到純化的融合蛋白,該融合蛋白是Ers-MIH1基因外顯子編碼的氨基酸,序列為:MetValSerArgAlaGlnSerArgPheSerSerGlnArgThrTrpLeuValAlaAlaVal161116ValLeuAlaValLeuCysSerPheGlyValGlnArgAlaAlaAlaGlyIleIleAsnAla21263136GluCysProAsnMetIleGlyAsnArgAspIleTyrLysLysValAspTrpIleCysGlu41465156AspCysAlaAsnIlePheArgIleAspGlyLeuGlyMetLeuCysArgLysAsnCysPhe61667176ArgAsnIleAspPheLeuTrpCysValTyrAlaSerGluArgHisAlaGlnLysAspAsp81869196LeuThrArgTyrValSerIleLeuGlyGln。101106
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摘要
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本發(fā)明屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域,所述的中華絨螯蟹(Eriocheir japonica sinensis)蛻皮抑制激素1(Ers-MIH1)基因長度為3506bp,包括3個(gè)外顯子、2個(gè)內(nèi)含子、412bp的5’端上游調(diào)控區(qū)和917 bp的3′端UTR。根據(jù)Ers-MIH1基因序列推導(dǎo)的多肽由75個(gè)氨基酸的成熟肽和35個(gè)氨基酸的信號(hào)肽組成。該成熟肽具有抑制中華絨螯蟹蛻皮的功能,從而對(duì)中華絨螯蟹的生長起重要的調(diào)控作用。Ers-MIH1基因的GenBank檢索號(hào)為AY310313。本發(fā)明利用Ers-MIH1基因克隆制備融合蛋白,并利用該蛋白免疫動(dòng)物制備多克隆抗體,同時(shí)將該抗體或該基因表達(dá)的控制用于解決養(yǎng)殖過程中出現(xiàn)的因蛻皮異常而致個(gè)體偏小的問題。
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國際公布
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