| 公開(公告)號 | CN1687125A |
| 公開(公告)日 | 2005.10.26 |
| 申請(專利)號 | CN200510012414.7 |
| 申請日期 | 2005.03.22 |
| 專利名稱 | 人重組組織因子的構建表達、純化方法及其應用 |
| 主分類號 | C07K14/43 |
| 分類號 | C07K14/43;C07K14/475;C12N15/70;C12N15/10;C12N15/12;C12P21/02;G01N33/68;G01N33/53;C12Q1/56 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 太原博奧特生物技術有限公司 |
| 發(fā)明(設計)人 | 焦進安;趙 邑;郝建平;李晉川;謝 紅;趙峰梅 |
| 地址 | 030006山西省太原市師范街110號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 山西五維專利事務所有限公司 |
| 代理人 | 李 毅 |
| 國省代碼 | 山西;14 |
| 主權項 | 一種人重組組織因子，含有天然人組織因子跨膜部分和膜外部分的243個氨基酸殘基，為缺失胞內區(qū)的截斷型人重組組織因子recombinanthumantissuefactor，簡稱rhTF243，具有天然人組織因子的全部凝血活性。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及人重組組織因子的構建、表達和純化方法及應用。從人胎盤中獲取得到的TF基因片段與phoA質粒重組，構建質粒載體pTF243，轉化到大腸桿菌MM294中，篩選得到工程菌株，接入培養(yǎng)基直接發(fā)酵表達，得到的菌液先使用Q-Sepharose Fast Flow基質離子交換層析，再通過TF單抗免疫親和層析柱吸附洗脫，得到rhTF243蛋白。本發(fā)明中TF隨培養(yǎng)基中磷的消耗而直接表達，不需增加誘導物和對蛋白質進行變性與復性，簡化了發(fā)酵工藝，提高了表達率，采用TF單抗純化rhTF243蛋白，不會受到不可逆損傷，獲得rhTF243純度95％以上，收率大于60％，制備的PT試劑穩(wěn)定性和敏感性均得到了提高。 |
| 國際公布 |
