| 公開(公告)號(hào) | CN1660878A |
| 公開(公告)日 | 2005.08.31 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200410081443.4 |
| 申請(qǐng)日期 | 2004.12.10 |
| 專利名稱 | 一種快速大量提純質(zhì)粒DNA的新方法 |
| 主分類號(hào) | C07H21/04 |
| 分類號(hào) | C07H21/04;C07H1/06 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 四川農(nóng)業(yè)大學(xué);王紅寧 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 王紅寧;汪洋;周生;胡慧瓊;余祖華;陳萍 |
| 地址 | 625014四川省雅安市新康路四川農(nóng)業(yè)大學(xué)科技管理處 |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國(guó)省代碼 | 四川;51 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種快速大規(guī)模提純質(zhì)粒DNA的新方法，其特征材料在于包括：(1)菌體清洗液，組分為0.1mmol/LNaCl，10mmol/LTris-HCl(pH8.0)，1mmol/LEDTA(pH8.0)；(2)菌體重懸緩沖液(R1)，R1的組分為50mmol/L葡萄糖、25mmol/LTris-Cl(pH8.0)，10mmol/LEDTA(pH8.0)，200μgRnaseA；(3)菌體裂解液(R2)，R2的組分為200mmol/LNaOH，1％SDS；(4)裂解中和液(R3)，R3的組分為4mmol/LKAc，pH4.8；(5)異丙醇(R4)，R4的組分為商業(yè)分析純?cè)噭?6)硅藻土懸液(R5)，R5的組分為5克硅藻土與50ml7mol/鹽酸胍混合，取用時(shí)搖勻；(7)蛋白洗滌液(R6)，R6的組分為50％乙醇，100mmol/LNaCl，10mmol/LTris-HCl(pH7.5)，5mmol/LEDTA；(8)80％乙醇(R7)，R7的組分為80％的分析純的乙醇；(9)DNA稀釋液(R8)，R8的組分為TE緩沖液(10mmol/LTris-HClpH7.5，1mmol/LEDTA)；(10)另需有若干50--100ml離心管。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及分子生物學(xué)研究領(lǐng)域，為一種簡(jiǎn)易快速大規(guī)模提純質(zhì)粒DNA的新方法。本方法所用試劑包括菌體清洗液、菌體重懸緩沖液、菌體裂解液、裂解中和液、異丙醇、硅藻土懸液、蛋白洗滌液、80％乙醇、DNA稀釋液九種試劑和50ml-100ml離心管。本發(fā)明與現(xiàn)有提純方法比較操作簡(jiǎn)便，一次提取僅需90分鐘。本發(fā)明結(jié)果穩(wěn)定，得量高，純度好，無蛋白質(zhì)和RNA污染，與應(yīng)用Qiagen柱式純化試劑盒和國(guó)產(chǎn)賽百盛樹脂型試劑盒提取相同的質(zhì)粒DNA比較，所得DNA的電泳條帶同樣清晰，無RNA混雜。本發(fā)明價(jià)格低廉，不需用酚和氯仿等有毒試劑，經(jīng)放大可用于DNA疫苗的制備。 |
| 國(guó)際公布 |
