| 公開(公告)號 | CN1195069C |
| 公開(公告)日 | 2005.03.30 |
| 申請(專利)號 | CN02138677.3 |
| 申請日期 | 2002.11.28 |
| 專利名稱 | 人卵泡刺激素β亞基單克隆抗體的制備方法 |
| 主分類號 | C12P21/08 |
| 分類號 | C12P21/08 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 南京醫(yī)科大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 卞倩;管曉虹;宋玲;仇鎮(zhèn)寧 |
| 地址 | 210029 江蘇省南京市漢中路140號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 南京蘇高專利事務(wù)所 |
| 代理人 | 柏尚春 |
| 國省代碼 | 江蘇;32 |
| 主權(quán)項 | 一種人卵泡刺激素β亞基單克隆抗體的制備方法，其特征在于其方法為：1.1制備免疫原：以人工合成的FSHβ多肽片段為免疫原，其氨基酸序列為YTRDLVYKNP，將其滴在硝酸纖維素膜上；1.2免疫：按常規(guī)外科操作將硝酸纖維膜埋入待免疫的小鼠脾內(nèi)，間隔兩周后加強免疫，腹腔注射抗原肽與福氏不完全佐劑混合液，第三次免疫起每次免疫間隔3周至1個月；1.3篩選：用酶聯(lián)免疫吸附法篩選免疫鼠血清；1.4細(xì)胞融合、篩選及克隆化：選抗血清效價最高的鼠取脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞體外融合，經(jīng)三次亞克隆獲得穩(wěn)定分泌抗FSHβ的單克隆抗體細(xì)胞株；1.5單克隆抗體的提取與純化：將以上的細(xì)胞株體外擴大培養(yǎng)后，定期收集上清液以鹽析法純化；1.6腹水制備：將擴大培養(yǎng)后的細(xì)胞株打入老齡鼠腹腔以生產(chǎn)大量腹水，經(jīng)提取、純化后即可得到FSHβ亞基單克隆抗體。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種人卵泡刺激素β亞基單克隆抗體的制備方法，其方法為：①制備免疫原：以人工合成的FSH β多肽片段為免疫原，將其滴在硝酸纖維素膜上；②免疫：將硝酸纖維膜埋入待免疫的小鼠脾內(nèi)，間隔兩周后加強免疫，第三次免疫起每次免疫間隔3周至1個月；③篩選：用酶聯(lián)免疫吸附法篩選免疫鼠血清；④細(xì)胞融合、篩選及克隆化；⑤單克隆抗體的提取與純化；⑥腹水制備；人卵泡刺激素β亞基單克隆抗體的制備方法是一種應(yīng)用單克隆抗體制備技術(shù)，以人工合成的多肽——人卵泡刺激素的一個組成單位，β亞基的氨基酸片段——為免疫原制備得到靈敏性高、特異性強、實用性好的鼠源性抗人卵泡刺激素β亞基單克隆抗體。 |
| 國際公布 |
