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以腫瘤細胞PLK1為藥靶的抗癌重組腺病毒的構建及用途

公開(公告)號 CN1552877A  
公開(公告)日 2004.12.08  
申請(專利)號 CN03126757.2  
申請日期 2003.06.05  
專利名稱 以腫瘤細胞PLK1為藥靶的抗癌重組腺病毒的構建及用途  
主分類號 C12N15/861  
分類號 C12N15/861;C12N7/01;C12N15/64;C12N15/33;C12N5/10;A61K48/00;A61P35/00  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權  
申請(專利權)人 深圳市奧尼克斯基因技術有限公司  
發(fā)明(設計)人 周劍峰;馬 丁;盧運萍;王世宣;陳 剛;高慶蕾  
地址 518057廣東省深圳市高新區(qū)南區(qū)R3棟B座710室  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構  
代理人  
國省代碼 廣東;44  
主權項 一種重組腺病毒構建體,其命名及技術特征在于:該構建體命名為Δ923-946ADV5/ASPLK1,它缺失了ADV5923-946nt序列CTTACCTGCCACGAGGCTGGCTTT,該序列編碼E1A蛋白122至129位基酸,同時,它缺失了ADV5E3區(qū)28532-29360nt,在該缺失區(qū)域引入一個ClaI酶切位點,并在ClaI酶切位點中反向插入相當于PLK1mRNA的960-161nt的cDNA片段,其他基因組結構與野生型ADV5完全相同。  
摘要 本發(fā)明公開了一種人工改造人類5型腺病毒(ADV5)的構建方案,以及用該方案獲取的重組腺病毒構建體在腫瘤治療的具體用途。用PCR擴增定點缺失、同源重組、轉染、腺病毒單克隆純化等技術,獲得一種重組腺病毒構建體,其特征在于:ADV5基因組E1A保守序列2(CR2)編碼序列24個堿基缺失;ADV5 E3區(qū)28532-29360 nt缺失;并在該區(qū)域反向插入部分PLK1 cDNA片段。該重組腺病毒構建體能選擇性地在腫瘤細胞內復制增殖;插入的反義PLK1cDNA片段在腫瘤細胞內特異性表達;對腫瘤細胞具有強效旁觀者效應。從而特異性殺滅腫瘤細胞,同時對正常細胞無殺滅效應。該構建體在腫瘤治療藥物、診斷試劑的制備中具有獨特的實用價值,同時也為腫瘤基因治療提供了理想的基因靶點特異性治療應用途徑。  
國際公布  
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