公開(公告)號
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CN1548525A
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公開(公告)日
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2004.11.24
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申請(專利)號
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CN02108973.6
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申請日期
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2002.04.16
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專利名稱
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酵母重組株及IFNα-la干擾素的純化方法
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主分類號
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C12N1/19
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分類號
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C12N1/19;C12N15/20;C12N15/81;C12N15/21;C07K14/56;C07K1/14
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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海南海梁生物高科技有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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梁國棟;周鵬;夏中寧
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地址
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570216海南省海口市金盤工業(yè)區(qū)金盤路17號嘉海大廈三樓
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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代理人
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國省代碼
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海南;66
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主權(quán)項(xiàng)
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一種酵母重組株,其特征在于將克隆修飾的α-1a干擾素基因插入pGAPZα-A之GAP啟動(dòng)子/α-factor信號肽下游位點(diǎn),刪除Kex2(Lys-Arg)位點(diǎn)之后的Ste13位點(diǎn)(Glu-Ala-Glu-Ala)和啟始密碼子ATG,構(gòu)建成α-1a干擾素基因分泌型表達(dá)載體IFNα-1a/pGAPZα-A,轉(zhuǎn)入畢赤氏酵母(Pichiapastoris)的菌株GS115,構(gòu)建成分泌型α-1a干擾素的酵母重組株IFNα-1a/pGAPZα-A/GS115。
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摘要
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本發(fā)明涉及分泌表達(dá)α-1a干擾素的酵母工程菌株IFN α-1a/pGAPZ α-A/GS115構(gòu)建的關(guān)鍵技術(shù)、構(gòu)建結(jié)果及利用它來生產(chǎn)α-1a干擾素的純化方法。本發(fā)明采用酵母分泌表達(dá)系統(tǒng)取代大腸桿菌包涵體表達(dá)系統(tǒng),目標(biāo)蛋白α-1a干擾素不需要復(fù)性,其生物比活性可達(dá)到1.0×109單位/毫克蛋白,低毒副作用;在純化過程中,不需要價(jià)值昂貴的單抗柱,即可從發(fā)酵液中提取獲得純度達(dá)95%以上的目標(biāo)蛋白α-1a干擾素,降低了生產(chǎn)成本。
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國際公布
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