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酵母重組株及IFNα-la干擾素的純化方法

公開(公告)號 CN1548525A  
公開(公告)日 2004.11.24  
申請(專利)號 CN02108973.6  
申請日期 2002.04.16  
專利名稱 酵母重組株及IFNα-la干擾素的純化方法  
主分類號 C12N1/19  
分類號 C12N1/19;C12N15/20;C12N15/81;C12N15/21;C07K14/56;C07K1/14  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 海南海梁生物高科技有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 梁國棟;周鵬;夏中寧  
地址 570216海南省海口市金盤工業(yè)區(qū)金盤路17號嘉海大廈三樓  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu)  
代理人  
國省代碼 海南;66  
主權(quán)項(xiàng) 一種酵母重組株,其特征在于將克隆修飾的α-1a干擾素基因插入pGAPZα-A之GAP啟動(dòng)子/α-factor信號肽下游位點(diǎn),刪除Kex2(Lys-Arg)位點(diǎn)之后的Ste13位點(diǎn)(Glu-Ala-Glu-Ala)和啟始密碼子ATG,構(gòu)建成α-1a干擾素基因分泌型表達(dá)載體IFNα-1a/pGAPZα-A,轉(zhuǎn)入畢赤氏酵母(Pichiapastoris)的菌株GS115,構(gòu)建成分泌型α-1a干擾素的酵母重組株IFNα-1a/pGAPZα-A/GS115。  
摘要 本發(fā)明涉及分泌表達(dá)α-1a干擾素的酵母工程菌株IFN α-1a/pGAPZ α-A/GS115構(gòu)建的關(guān)鍵技術(shù)、構(gòu)建結(jié)果及利用它來生產(chǎn)α-1a干擾素的純化方法。本發(fā)明采用酵母分泌表達(dá)系統(tǒng)取代大腸桿菌包涵體表達(dá)系統(tǒng),目標(biāo)蛋白α-1a干擾素不需要復(fù)性,其生物比活性可達(dá)到1.0×109單位/毫克蛋白,低毒副作用;在純化過程中,不需要價(jià)值昂貴的單抗柱,即可從發(fā)酵液中提取獲得純度達(dá)95%以上的目標(biāo)蛋白α-1a干擾素,降低了生產(chǎn)成本。  
國際公布  
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