公開(公告)號
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CN1142277C
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公開(公告)日
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2004.03.17
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申請(專利)號
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CN97190542.8
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申請日期
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1997.05.15
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專利名稱
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鑒定減毒水痘病毒Oka株的方法
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主分類號
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C12N15/38
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分類號
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C12N15/38;C12Q1/70;C12N7/00;C07K14/04;A61K39/25
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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1996.5.15 JP 158795/1996
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申請(專利權(quán))人
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財團法人阪大微生物病研究會
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發(fā)明(設(shè)計)人
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森千里;高原理惠;納壽一郎;五味康行
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地址
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日本大阪
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頒證日
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2004.03.17
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國際申請
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PCT/JP97/01646 1997.5.15
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進入國家日期
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1998.01.14
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專利代理機構(gòu)
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中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標(biāo)事務(wù)所
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代理人
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郭建新
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國省代碼
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日本;JP
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主權(quán)項
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鑒定減毒水痘病毒Oka株的方法,它包括:分析樣品水痘病毒的基因組DNA及其DNA片斷;以及確定所述樣品水痘病毒的分析過的基因組DNA及其DNA片斷是否符合下列全部八個特征A1-A8:A1:用限制酶HpaI消化水痘病毒基因組DNA而獲得的K片斷的大小為3231bp;A2:用限制酶EcoRI消化水痘病毒基因組DNA而獲得的P片斷的大小為1749bp;A3:當(dāng)用限制酶AccIII處理采用SEQ ID NO.3的PCR引物1和SEQ ID NO.5的PCR引物3、通過PCR由水痘病毒基因組DNA擴增的DNA片斷時,該DNA片斷被切割成大小分別為1208bp和556bp的兩部分;A4:采用SEQ ID NO.4的PCR引物2和SEQ ID NO.5的PCR引物3、通過PCR由水痘病毒基因組DNA擴增的DNA片斷的大小為487bp;A5:就一DNA片斷而言,由PCR-SSCP測定的水痘病毒基因組DNA和減毒水痘病毒Oka株基因組DNA的電泳遷移率相同,其中,在所述PCR-SSCP的PCR中采用SEQ ID NO.4的PCR引物2和SEQ ID NO.5的PCR引物3;A6:采用SEQ ID NO.7的PCR引物PS1和SEQ ID NO.8的PCR引物PS2、通過PCR由水痘病毒基因組DNA擴增的DNA片斷缺少限制酶PstI切割位點;A7:由水痘病毒基因組DNA編碼、相應(yīng)于SEQ ID NO.1的162氨基酸序列的162氨基酸序列與SEQ ID NO.1的162氨基酸序列之間的同源性為98-100%;和A8:由水痘病毒基因組DNA編碼、相應(yīng)于SEQ ID NO.2的560氨基酸序列的560氨基酸序列與SEQ ID NO.2的560氨基酸序列之間的同源性為99-100%。
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摘要
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公開了一種精確鑒定減毒水痘病毒Oka株的方法,該方法包括:分析Oka株和樣品水痘株之間基因組DNA及其片斷的差異,并且確定樣品株是否符合下列全部8個特征:HpaI-K片斷和EcoRI-P片斷的大;Gene14的R2-487區(qū)域的大小以及PCR-SSCP分析;用AccIII消化R2-1764片斷而獲得的限制片斷的大;PstI切割位點存在與否;由R2-487區(qū)域編碼的氨基酸序列的同源性;由VZV Gene14的編碼區(qū)編碼的氨基酸序列的同源性。該方法可用于減毒水痘活疫苗的質(zhì)量控制。還公開了可用于該方法的引物對。
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國際公布
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WO97/43420 日 1997.11.20
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