網(wǎng)站首頁(yè)
醫(yī)師
藥師
護(hù)士
衛(wèi)生資格
高級(jí)職稱
住院醫(yī)師
畜牧獸醫(yī)
醫(yī)學(xué)考研
醫(yī)學(xué)論文
醫(yī)學(xué)會(huì)議
考試寶典
網(wǎng)校
論壇
招聘
最新更新
網(wǎng)站地圖
您現(xiàn)在的位置: 醫(yī)學(xué)全在線 > 藥學(xué)理論 > 中國(guó)藥品專利文獻(xiàn) > 正文:人鼻咽組織特異性基因NASG編碼蛋白及其抗體的制備專利檢索:專利號(hào)/專利人/發(fā)明人
    

人鼻咽組織特異性基因NASG編碼蛋白及其抗體的制備

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫(kù)中心 藥學(xué)論壇 中南大學(xué)/李桂源;張必成;李小玲;沈守榮
公開(公告)號(hào) CN1482244A  
公開(公告)日 2004.03.17  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN02139605.1  
申請(qǐng)日期 2002.09.13  
專利名稱 人鼻咽組織特異性基因NASG編碼蛋白及其抗體的制備  
主分類號(hào) C12N15/12  
分類號(hào) C12N15/12;C07K14/435;C07K14/47;C07K16/18  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 中南大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 李桂源;張必成;李小玲;沈守榮  
地址 410083湖南省長(zhǎng)沙市麓山南路  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 中南大學(xué)專利中心  
代理人 龔燦凡  
國(guó)省代碼 湖南;43  
主權(quán)項(xiàng) 一種人鼻咽組織特異性基因NASG編碼蛋白的制備方法,其特征在于:本發(fā)明利用鼻咽組織特異性基因和鼻咽癌易感基因,對(duì)在鼻咽組織特異性表達(dá)且在鼻咽癌表達(dá)下調(diào)基因NASG的編碼蛋白,其具體方案為:1>GST/NASG融合蛋白的原核表達(dá):①據(jù)原核表達(dá)載體pEGX-4T-2的GST閱讀框架設(shè)計(jì)引物,使NASG基因的編碼區(qū)閱讀框與GST的閱讀框架一致;②以成人鼻咽cDNA文庫(kù)為模板,PCR擴(kuò)增NASG基因的編碼區(qū),回收PCR產(chǎn)物條帶;③將pEGX-4T-2載體分別與NASG基因連接,構(gòu)建成符合讀框的融合基因;④挑單個(gè)陽(yáng)性菌落接種入含氨卞青霉素(100μg/ml)的2ml LB培養(yǎng)液中,37℃,過夜培養(yǎng);將50μl過夜培養(yǎng)物分別接種到5ml含氨卞青霉素(100μg/ml)的LB培基中,于37℃培養(yǎng)2h,加入IPTG至終濃度為1mmol/L,37℃,在培養(yǎng)的不同時(shí)刻各取1ml轉(zhuǎn)移至微量離心管中,離心去上清,將沉淀重懸于25μl TE中,再加25μl 2×SDS凝膠加樣緩沖液中,混勻菌液,20kHz超聲破碎,收集上清液;在12%SDS-聚丙烯酰胺凝膠中各加15μl上清進(jìn)行電泳,80-120V室溫電泳8h,考馬斯亮藍(lán)染色,觀察到NASG融合蛋白的表達(dá);2>融合蛋白的分離純化:用谷胱苷肽Sepharose 4B過柱分離、純化融合蛋白。  
摘要 人鼻咽組織特異性基因NASG編碼蛋白及其抗體的制備。本發(fā)明采用成人鼻咽組織cDNA制備檢測(cè)子(tester),以成人食管、肺、肝、心、胃、脾、肌肉、腎和皮膚cDNA制備驅(qū)趕子(driver),采用抑制性消減雜交技術(shù)獲得14個(gè)鼻咽差異表達(dá)基因的cDNA片段。NASG基因在人鼻咽組織特異性表達(dá)且在鼻咽癌中表達(dá)下調(diào)(34/48),NASG編碼產(chǎn)物及其抗體的制備將為鼻咽癌的基因診斷和治療提供新的手段;蛟\斷的特點(diǎn)是靈敏度高、特異性強(qiáng)、取材一般不受組織或時(shí)相限制,能夠?qū)崿F(xiàn)鼻咽癌的早診斷、早發(fā)現(xiàn)和早治療。是一種全新的治療策略,有望實(shí)現(xiàn)鼻咽癌的無創(chuàng)傷性、根治性治療。  
國(guó)際公布  
...
關(guān)于我們 - 聯(lián)系我們 -版權(quán)申明 -誠(chéng)聘英才 - 網(wǎng)站地圖 - 醫(yī)學(xué)論壇 - 醫(yī)學(xué)博客 - 網(wǎng)絡(luò)課程 - 幫助
醫(yī)學(xué)全在線 版權(quán)所有© CopyRight 2006-2010, MED126.COM, All Rights Reserved
皖I(lǐng)CP備06007007號(hào)
百度大聯(lián)盟認(rèn)證綠色會(huì)員可信網(wǎng)站 中網(wǎng)驗(yàn)證