公開(公告)號(hào)
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CN1463749A
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公開(公告)日
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2003.12.31
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN02121244.9
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申請(qǐng)日期
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2002.06.11
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專利名稱
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抗咽喉炎特異性復(fù)合IgY及其制劑
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主分類號(hào)
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A61K39/395
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分類號(hào)
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A61K39/395;A61P11/04
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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雅臣藥業(yè)集團(tuán)(遠(yuǎn)東)有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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胡義結(jié);楊榮鑑;包海威;包晟
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地址
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518001 廣東省深圳市筍崗東路3002號(hào)萬通大廈2218-2219室
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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北京太兆天元知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司
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代理人
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張韜
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國(guó)省代碼
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廣東;44
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主權(quán)項(xiàng)
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一種抗咽喉炎復(fù)合IgY粗提物,其特征在于該IgY粗提物是由如下方法制備的:優(yōu)選具高免疫應(yīng)答能力的良種雞:用A簇溶血性鏈菌制作抗原,分別免疫母雞,每次注射1ml抗原在第一次注射后,每隔二周再?gòu)?qiáng)化注射一次,共三次;于第一次注射后第7個(gè)月,把這些雞所產(chǎn)的蛋標(biāo)記后分別提取其中的IgY,以ELISA法檢測(cè)所制得的IgY的效價(jià);再比較其效價(jià),選出其中能制得IgY效價(jià)≥1∶128的免疫應(yīng)答能力特別強(qiáng)的雞只,再用這批雞所產(chǎn)的蛋孵出優(yōu)良雞種,待其長(zhǎng)大至2-3個(gè)月,作為本發(fā)明優(yōu)選的高免疫應(yīng)答能力的特種雞;復(fù)合抗原的制備:選取A簇B型溶血性鏈球菌、肺炎雙球菌、G簇溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌為咽喉炎和扁桃腺炎主要致病菌;購(gòu)買市售以上五種主要致病菌菌株,用細(xì)菌培養(yǎng)基分別在三氣培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng);將培養(yǎng)好的細(xì)菌按A簇B型溶血型鏈球菌占45-30%,肺炎雙球菌占15-25%,G簇溶血性鏈球菌占10-15%,金黃色葡萄球菌占10-20%,白色葡萄球菌占20-10%的比例混合勻化;按1∶1的比例將福氏佐劑加入混合好的菌株混和體中攪拌均勻,制得乳狀全菌復(fù)合抗原;將全菌復(fù)合抗原放入高速勻漿機(jī)中,高速粉碎勻化,制得全菌和菌體成份的復(fù)合抗原;分別對(duì)優(yōu)選的特種雞進(jìn)行強(qiáng)化免疫:用所制取的復(fù)合抗原,采用皮下注射和翅靜脈注射相結(jié)合的強(qiáng)化免疫法,分別對(duì)優(yōu)選的特種雞進(jìn)行免疫,每只雞每次注射量達(dá)到1-2ml抗原,相當(dāng)于30-60億個(gè)細(xì)菌;每隔二周再?gòu)?qiáng)化注射一次,一個(gè)月內(nèi)共免疫三次;第一次免疫注射20天后,檢取雞所產(chǎn)免疫蛋;抗咽喉炎復(fù)合IgY粗提物的制備:用打蛋機(jī)將檢取的免疫蛋打碎,用蛋黃篩篩濾去蛋清,留下蛋黃,攪拌均勻;測(cè)量所得的蛋黃的體積,按此體積的4-6倍加入蒸餾水,進(jìn)行稀釋并混合均勻;用NaOH溶液調(diào)整pH至5.5-6.0之間;將調(diào)整好pH值的稀釋液進(jìn)一步充分?jǐn)嚢杈鶆,然后將其冷卻至2-6℃,靜置12小時(shí)-24小時(shí);將稀釋液加入高速離心分離機(jī)中,離心分離20分鐘;將分離所得的上清再加入超濾器中進(jìn)行超濾并濃縮10-20倍,按0.1~0.3%的比例將海藻酸鈉加入濃縮后的漿料中,充分?jǐn)嚢;再加入高速離心機(jī)中離心,取上清,去除脂蛋白;將離心分離后的漿料加入超濾機(jī),過超微膜,進(jìn)行過濾除菌;將過濾除菌后的產(chǎn)品用冷凍干燥機(jī)進(jìn)行冷凍干燥,即制得抗咽喉炎復(fù)合IgY粗提物干粉成品。
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摘要
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本發(fā)明公開一種抗咽喉炎特異性復(fù)合IgY及其制備方法和制劑。本發(fā)明抗咽喉炎特異性復(fù)合IgY通過優(yōu)選具高免疫應(yīng)答能力的良種雞,用全菌和菌體成份的復(fù)合抗原,分別對(duì)優(yōu)選的特種雞進(jìn)行強(qiáng)化免疫,檢取強(qiáng)化免疫雞所產(chǎn)免疫蛋,制得抗咽喉炎復(fù)合IgY粗提物干粉成品,IgY粗提物進(jìn)行純化,即得純IgY。用本發(fā)明IgY制備的抗咽喉炎口噴制劑無化學(xué)有害物質(zhì)、天然安全并可直接噴服。
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國(guó)際公布
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