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一種擬威克酵母變種抗腫瘤活性槐糖脂粗提物的制備方法

公開(公告)號(hào) CN1839892A  
公開(公告)日 2006.10.04  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200610042181.X  
申請(qǐng)日期 2006.01.13  
專利名稱 一種擬威克酵母變種抗腫瘤活性槐糖脂粗提物的制備方法  
主分類號(hào) A61K36/064(2006.01)I  
分類號(hào) A61K36/064(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;C07H1/08(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 山東大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 宋 欣;曲音波;陳 靜  
地址 250100山東省濟(jì)南市山大南路27號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 濟(jì)南圣達(dá)專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 鄭華清  
國(guó)省代碼 山東;37  
主權(quán)項(xiàng) 一種擬威克酵母變種(Wickerhamielladomercqiaevar.sophorolipid)抗腫瘤活性槐糖脂粗提物的制備方法,制備形式為:直接從擬威克酵母變種發(fā)酵全液中分離出抗腫瘤活性槐糖脂粗提物; 上述擬威克酵母變種抗腫瘤活性槐糖脂粗提物的制備方法由以下步驟組成: (1)自然沉降:取經(jīng)液體發(fā)酵的擬威克酵母變種(Wickerhamielladomercqiaevar.sophorolipid)CGMCCNo.1576發(fā)酵全液,靜置1~6小時(shí),自然沉降,收集發(fā)酵液中的淺黃色粘稠物質(zhì);之后以4000~7000轉(zhuǎn)/分鐘將上述粘稠物質(zhì)離心,收集沉淀部分; (2)乙酸乙酯萃取:將上述經(jīng)離心得到的沉淀物中加入其體積量為3~10倍的乙酸乙酯,在25~37℃下,萃取2~8小時(shí); (3)過濾:將上述乙酸乙酯萃取液在25~37℃下,用WhatmanNo.2濾紙過濾,收集濾渣; (4)洗滌:上述步驟(3)得到的濾渣用其體積量為3~10倍的乙酸乙酯在25~37℃下,洗滌2~4次; (5)減壓蒸餾:洗滌完畢后收集濾渣,在溫度50~70℃,壓力0.2~0.8Kg/cm2,真空度為0.02~0.08Mpa的條件下進(jìn)行減壓蒸餾,將濾液中的乙酸乙酯蒸發(fā)去除; (6)收集物干燥:將上述收集的減壓蒸餾殘?jiān),?0~100℃,真空度0.02~0.08Mpa條件下,真空干燥12~24小時(shí),制得固體槐糖脂粗提物; (7)槐糖脂乙醇溶液制備:將上述步驟(6)得到的槐糖脂固體配成濃度為20~100μg/mL槐糖脂乙醇溶液用于體外抑瘤試驗(yàn)。  
摘要 本發(fā)明公開一種擬威克酵母變種(Wickerhamiella domercqiae var. sophorolipid)抗腫瘤活性槐糖脂粗提物的制備方法,該方法包括擬威克酵母變種發(fā)酵全液經(jīng)過自然沉降、乙酸乙酯萃取、過濾、洗滌、減壓蒸餾、收集物干燥和槐糖脂乙醇溶液制備等步驟。本發(fā)明的方法提取的擬威克酵母變種槐糖脂粗提物在125μg/mL濃度下對(duì)人肝癌細(xì)胞系H7402和肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549具有完全的抑制作用,而對(duì)正常細(xì)胞沒有不良作用,且該方法具有工藝簡(jiǎn)便、成本低的特點(diǎn)。  
國(guó)際公布  
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