川貝母類藥材聚合酶鏈反應(yīng)-限制性酶切圖譜鑒定方法
公開(公告)號(hào)
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CN1227358C
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公開(公告)日
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2005.11.16
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN03131798.7
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申請(qǐng)日期
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2003.07.30
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專利名稱
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川貝母類藥材聚合酶鏈反應(yīng)-限制性酶切圖譜鑒定方法
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主分類號(hào)
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C12N15/10
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分類號(hào)
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C12N15/10;C12Q1/68
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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中國(guó)藥科大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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李 萍;王沖之
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地址
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210038江蘇省南京市神農(nóng)路1號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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南京知識(shí)律師事務(wù)所
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代理人
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胡錫瑜
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國(guó)省代碼
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江蘇;32
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主權(quán)項(xiàng)
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用于鑒別川貝母的PCR擴(kuò)增引物對(duì),其特征在于:該引物對(duì)為P1:5’-CGTAACAAGGTTTCCGTAGGTGAA-3’;P2:5’-GCTACGTTCTTCATCGAT-3’。
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摘要
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本發(fā)明屬于中藥材種質(zhì)的品質(zhì)鑒定技術(shù)領(lǐng)域,目的是提供一種準(zhǔn)確鑒別川貝母與非川貝母類藥材的聚合酶鏈反應(yīng)-限制性酶切圖譜分子鑒定方法(PCR-RFLP)。PCR擴(kuò)增所用引物序列為:P1:5’-CGT AAC AAG GTT TCC GTA GGTGAA-3’,P2:5’-GCT ACG TTC TTC ATC GAT-3’;川貝母的特征DNA堿基序列為:5’-TGCCCGCCCT GCCCGGGACC TCGC-3’;限制性內(nèi)切酶Sma I及其同切酶可識(shí)別并切割該序列。鑒定過程如下:提取藥材DNA;用引物P1、P2進(jìn)行PCR擴(kuò)增;用限制性內(nèi)切酶Sma I或其同切酶消化PCR產(chǎn)物;瓊脂糖凝膠電泳分析結(jié)果;通過與川貝母PCR-RFLP特征結(jié)果相比較,即可判斷供試品是否川貝母藥材。
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國(guó)際公布
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評(píng)論加載中...