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人類(lèi)細(xì)胞中體的蛋白質(zhì)復(fù)合物的分離方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN100357316C  
公開(kāi)(公告)日 2007.12.26  
申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) CN200410041095.8  
申請(qǐng)日期 2004.06.23  
專(zhuān)利名稱(chēng) 人類(lèi)細(xì)胞中體的蛋白質(zhì)復(fù)合物的分離方法  
主分類(lèi)號(hào) C07K1/30(2006.01)I  
分類(lèi)號(hào) C07K1/30(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 姚雪彪;符傳孩;繆 勇;薛 宇  
地址 230026安徽省合肥市金寨路96號(hào)中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)專(zhuān)利辦公室  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) 安徽合肥華信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 余成俊  
國(guó)省代碼 安徽;34  
主權(quán)項(xiàng) 人類(lèi)細(xì)胞中體的蛋白質(zhì)復(fù)合物的分離方法,包括將人體細(xì)胞培養(yǎng)同步化及收集、加入低滲液重懸并孵育使收集細(xì)胞膨脹、破碎重懸的膨脹細(xì)胞后取出上清、通過(guò)密度梯度進(jìn)行離心分離并利用去污劑抽提純化得到中體蛋白質(zhì)復(fù)合物、分離鑒定中體蛋白種類(lèi),其特征在于,所述人體細(xì)胞培養(yǎng)同步化及收集過(guò)程中,所述同步化培養(yǎng)、收集的細(xì)胞是有絲分裂末期的人體細(xì)胞,其步驟為:(1)使細(xì)胞同步于G1/S期;(2)使細(xì)胞同步通過(guò)S期;(3)使細(xì)胞同步在有絲分裂前中期;(4)使細(xì)胞高度同步在有絲分裂末期;(5)用常規(guī)方法收集處于有絲分裂末期的細(xì)胞。  
摘要 本發(fā)明涉及涉及人體細(xì)胞分離技術(shù)。所述的人類(lèi)細(xì)胞中體的蛋白質(zhì)復(fù)合物,它至少由129種蛋白組成,其中有30種細(xì)胞骨架蛋白、4種中心體蛋白、6種囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白、6種染色體調(diào)節(jié)蛋白、2種馬達(dá)蛋白、3種檢測(cè)點(diǎn)蛋白、7種降解調(diào)控蛋白、9種膜蛋白、12種轉(zhuǎn)錄與翻譯相關(guān)蛋白、28種蛋白激酶、5種線粒體蛋白、9種分子伴侶蛋白和7種未知類(lèi)蛋白。在分離方法中,包括將人體細(xì)胞培養(yǎng)同步化及收集、加入低滲液重懸并孵育使收集細(xì)胞膨脹、破碎重懸的膨脹細(xì)胞后取出上清、通過(guò)密度梯度進(jìn)行離心分離并利用去污劑抽提純化蛋白質(zhì)復(fù)合物、分離鑒定中體蛋白種類(lèi)。人類(lèi)細(xì)胞中體的蛋白質(zhì)復(fù)合物組成的揭示為篩選抗腫瘤藥物提供了模式系統(tǒng)和靶標(biāo)蛋白ezrin及靶位。  
國(guó)際公布  
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