狂犬病的實驗室診斷有哪些?
感謝大夫為我快速解答——該如何治療和防治
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1?直接染色法剖檢病犬取大
小腦、延腦等，最好取
海馬回，各切取lcm3小塊，置滅菌容器，在冷藏條件下運(yùn)送至實驗室。若檢查內(nèi)基氏小體，可切取海馬回，置吸水紙上，切面向上，載玻片輕壓切面，制成壓印標(biāo)本，室溫自然干燥后染色鏡檢，檢查有無特異包涵體。內(nèi)基氏小體位于神經(jīng)細(xì)胞胞漿內(nèi)，直徑3?20fxm不等，呈橢圓形，呈嗜酸性著染（鮮紅色)，檢出內(nèi)基氏體，即可診斷為狂犬病。犬腦的陽性檢出率為70%左右，在檢查犬腦時還應(yīng)注意與犬瘟熱病毒引起的包涵體相區(qū)別。熒光抗體法也是一種特異而快速的直接染色檢查診斷法。將本病高免血清用熒光色素標(biāo)記，制成熒光抗體。取可疑病例腦組織或唾液腺制成壓印片或冰凍切片，用熒光抗體染色，在熒光顯微鏡下觀察，胞漿內(nèi)出現(xiàn)亮綠色熒光顆粒者為陽性。該方法用于動物腦組織陽性檢出率很高，可達(dá)95%，是狂犬病的一種較好的診斷方法。2.病毒分離取患病動物的腦或唾液腺等材料并用緩沖鹽水或含10%滅活豚鼠血清的生理鹽水研磨成乳劑，腦內(nèi)接種5?7日齡乳鼠，每只注射0.03mL。接種后繼續(xù)由母鼠同窩哺養(yǎng)，3?4天后如發(fā)現(xiàn)母鼠哺乳力減弱、痙攣、麻痹死亡，即可取其腦組織檢查包涵體，并制成抗原，做病毒鑒定。如經(jīng)7天仍不發(fā)病，可殺死其中2只，剖取鼠腦做成懸液，如上傳代。如第二代仍不發(fā)病，可再傳代。連續(xù)
盲傳三代，觀察4周而仍不發(fā)病者可判作陰性。也可應(yīng)用3周齡以內(nèi)的幼鼠，如上做腦內(nèi)接種，每只0.03mL。如有條件，可同時接種倉
鼠腎原代細(xì)胞或倉鼠腎繼代細(xì)胞和BHK-21細(xì)胞等。新分離的病毒可用電子顯微鏡直接觀察，或者應(yīng)用抗狂犬病特異免疫血清進(jìn)行中和試驗或血凝抑制試驗加以鑒定。3.血清學(xué)檢驗常用的血清學(xué)方法主要有中和試驗、補(bǔ)體結(jié)合試驗、間接熒光抗體試驗、交叉保護(hù)試驗、血凝抑制試驗以及間接免疫酶試驗等。一般實驗室常用的血清學(xué)診斷法為中和試驗。近年來已將單克隆抗體技術(shù)用于狂犬病的診斷，特別適用于區(qū)別狂犬病病毒與該病毒屬的其他相關(guān)病毒。此外，還有斑點免疫測定、核酸雜交技術(shù)、PCR技術(shù)、對流免疫電泳、Western印跡等新型診斷方法。
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