胃腸道產(chǎn)生的分泌性IgA（SIgA)在其粘膜表面形成重要的免疫保護(hù)層能防止抗原性物質(zhì)進(jìn)入粘膜，對局部炎癥和腫瘤的發(fā)生發(fā)展起重要作用，也是近年來研究局部粘膜免疫反應(yīng)的重要課題。
人體內(nèi)主要含有兩種形式IgA。一種為s IgA單體，主要存在血清中，多來自脾臟、骨髓和腸系膜淋巴細(xì)胞的漿細(xì)胞。另一種是與分泌成分（secretory component, SC)結(jié)合的二聚體，即SIgA，沉降系數(shù)為11S，主要存在唾液、初乳及胃腸道等分泌液中。成人腸道每天能分泌3gSIgA。目前多認(rèn)為胃腸道是s IgA的中樞器官。SIgA由SC、J鏈和二個IgA單體組成，形成過程包括：SC的合成、J鏈和IgA合成、IgA與SC結(jié)合和SIgA分泌。SC是分子量為83000dalton左右的糖蛋白，由549～558個氨基酸和20%糖組成，其轉(zhuǎn)錄基因在上皮細(xì)胞的第1對染色體上。我們用免疫細(xì)胞化學(xué)染色證實SC主要分布在分泌性腺上皮細(xì)胞基底側(cè)膜及游離腔面的胞漿內(nèi)。杯狀細(xì)胞含SC很少。SC作為免疫球蛋白的受體在Sm.payment-defi.com/kuaiji/IgA的合成中起重要作用。目前已經(jīng)證實SC與胃腸道固有層IgA產(chǎn)生細(xì)胞分泌的二聚體和J鏈形成二硫鍵。雖然40%IgG和IgD產(chǎn)生細(xì)胞也含有J鏈，但很快被溶解，故SC不能與IgG與IgD相結(jié)合。SC能與IgM五聚體結(jié)合，但結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，易被消化酶破壞。SC與IgA結(jié)合及SIgA分泌過程是近年來研究的重點課題。SC作為特異性受體位于上皮細(xì)胞膜上，其膜外部分（最外層100個氨基酸殘基，即SC1)非共價鍵與J鏈和IgA的α鏈可變區(qū)（Cα3)結(jié)合，SC緊靠細(xì)胞膜部分（SC5)與IgA二聚體的另一條鏈α鏈（Cα2)形成二硫鍵。結(jié)合的SIgA通過細(xì)胞吞飲作用（pinocytosis)進(jìn)入胞漿，在上皮細(xì)胞腔面釋放，近年的研究表明，小白鼠的肝細(xì)胞和人膽管上皮細(xì)胞也能合成SC。人膽汁中含有IgA單體多來自血液，少部分來自門脈區(qū)及膽管內(nèi)皮細(xì)胞下漿細(xì)胞。有趣的是有人發(fā)現(xiàn)慢性肝硬化患者周圍血B淋巴細(xì)胞也能產(chǎn)生IgA二聚體，其機(jī)理還不清楚。
SIgA分布在粘膜表面，能封閉細(xì)菌和病毒等抗原表面及其受體結(jié)合部位或與之凝集成團(tuán)狀，阻止病毒和細(xì)菌和粘附。SIgA與相應(yīng)抗原結(jié)合還可激活補體的替代途徑，造成抗原溶解，近年來也有人發(fā)出IgA也能通過ADCC發(fā)揮細(xì)胞毒作用。有人發(fā)現(xiàn)先天性缺乏SIgA的病人惡性腫瘤的發(fā)病率比正常人高20～50倍。小腸之所以很少發(fā)生惡性腫瘤，粘膜中含85%以上的IgA產(chǎn)生細(xì)胞是重要因素之一。因此，深入研究SIgA與消化道炎癥，感染和腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系有臨床實用價值。
1．染色特點
（1)要進(jìn)行SC和IgA組織定位，必須有相應(yīng)特異抗血清。SC抗血清國內(nèi)沒有生產(chǎn)。國內(nèi)商品IgA抗血清的抗原多來自人乳中的SIgA，具有雙重抗原性（SC和IgA)，不能特異進(jìn)行IgA組織定位，最好采用抗人α-重鏈抗血清。
（2)SC是糖蛋白，IgA是免疫球蛋白。在組織處理上雖然有人提出用冷凍切片或福爾馬林固定胰酶消化的方法，我們的體會用冷酒精直接固定法既簡單又方便。
（3)SC和IgA除一部分在細(xì)胞內(nèi)，也可以分布于間質(zhì)和粘膜表面。為了提高特異性，除了染色前用瓊脂擴(kuò)散、對照試驗、吸收試驗和抑制試驗等方法檢驗抗體的特異性和敏感性外，可采用伊文氏藍(lán)作對比染色。伊文氏藍(lán)肉眼下是藍(lán)色，在熒光鏡下是紅色，混合染色后能襯托FITC的綠色熒光，同時抑制非特異性熒光，不影響抗原抗體結(jié)合。如果特異性染色后再加伊文氏藍(lán)，比較費時間，效果不一定最佳。先用伊文氏藍(lán)染組織切片，再進(jìn)行特異性抗體染色能抑制抗原抗體結(jié)合，不宜使用。
2．染色步驟
（1)組織加工、固定及切片與抗體產(chǎn)生細(xì)胞研究（不需PBS浸洗)相同。先做HE染色，選縱向連續(xù)切片，脫蠟后在4℃PBS中浸洗3～5min，過一次蒸餾水后風(fēng)干待染。
（2)用伊文氏藍(lán)PBS稀釋FITC標(biāo)記的SC和IgA抗體，加在連續(xù)組織切片上，放入濕盒，37℃溫箱放置45min。
（3)取出切片，用BPS浸洗3次，每次5～10min。
（4)過一次蒸餾水后風(fēng)干，50%甘油封片，熒光顯微鏡觀察。
3．結(jié)果判斷和分析熒光鏡下組織切片底色為紅色熒光，SC和IgA呈綠色熒光。IgA和SC主要分布在分泌性腺體腔面、上皮細(xì)胞側(cè)膜及基底部，IgA還分布在間質(zhì)及固有層IgA產(chǎn)生細(xì)胞漿內(nèi)�？筛鶕�(jù)熒光強度進(jìn)行SC和IgA半定量分析，也可以用熒光光度計或數(shù)字減影技術(shù)進(jìn)行準(zhǔn)確定量。
1．胃十二指腸疾病我們用免疫熒光技術(shù)對胃和十二指腸疾病研究結(jié)果與Isaonacs相似，發(fā)現(xiàn)正常胃粘膜中胃體腺沒有IgA和SC分泌，僅上皮層有少量IgA和SC熒光。胃竇腺體細(xì)胞的腔面及側(cè)膜均有SC和IgA，間質(zhì)有IgA熒光，但沒有SC熒光，上皮層SC和IgA熒光較胃體強，證實SC為粘液分泌性腺體細(xì)胞所產(chǎn)生，在細(xì)胞側(cè)膜與IgA結(jié)合。正常十二指腸上皮細(xì)胞層SC和lgA特別豐富。粘膜下層十二指腸體腔面也有SC和lgA分布，但較因有層腺體細(xì)胞的分泌能力低。杯狀細(xì)胞缺乏分泌SC的能力。這可能與HLA-DR組織相關(guān)抗原有關(guān)。上皮層的SIgA可能是分泌后的功能定位。正常胃體能分泌鹽酸和胃蛋白酶，細(xì)菌或病毒感染機(jī)會少。胃竇特別是十二指腸粘膜多偏堿性環(huán)境，細(xì)菌和病毒等停留機(jī)會較多，SIgA增多可代償性增加粘膜免疫保護(hù)功能。
慢性淺表性胃炎時，腺體和上皮層SC及IgA熒光明顯增強。HE染色發(fā)現(xiàn)部分胃體腺轉(zhuǎn)化成粘液分泌性腺體（固有腺或幽門腺)即具備分泌SC和結(jié)合IgA的能力。間質(zhì)出現(xiàn)較多IgA產(chǎn)生細(xì)胞。這些病人可能正常粘膜屏障功能被破壞以SIgA免疫屏障功能代償。
在萎縮性胃炎中，正常腺體分泌SC功能增強，但腸上皮化生腺體及不典型增生腺體的SC熒光明顯減弱。從免疫學(xué)角度支持腸上皮化生與胃癌的發(fā)生有較密切關(guān)系。
胃癌的發(fā)生和發(fā)展與SC和IgA的關(guān)系日益受到重視。在我們的研究中，發(fā)現(xiàn)部分癌細(xì)胞能分泌SC，與腫瘤的分化程度和組織分類無明顯關(guān)系。臨床上可以用SC鑒別其它部位轉(zhuǎn)移腫瘤是否來自胃腸道，但也有人持不同的看法。腫瘤組織中IgA來源及s IgA在癌組織中的功能尚待進(jìn)一步研究。
2．腸道疾病潰瘍性結(jié)腸炎上皮細(xì)胞具有分泌SC的功能，但固有層IgA2產(chǎn)生細(xì)胞和J鏈的合成明顯減少，IgA1產(chǎn)生細(xì)胞增加。IgA2能對抗IgA溶解酶的在破壞，有較強的免疫保護(hù)功能。故雖然SIgA的總量沒有降低，但其免疫保護(hù)功能明顯減弱，導(dǎo)致細(xì)菌或病毒感染，引起糜爛和潰瘍。也有人發(fā)現(xiàn)炎癥性反應(yīng)性不典型增生的腺體分泌SC能力明顯增強，具有癌變前期的不典型增生腺體明顯減弱，而且隨不典型增生程度加重，分泌SC和結(jié)合IgA能力減弱越明顯，說明SC的免疫組織化學(xué)染色對鑒別良惡性不典型增生有一定價值。有人認(rèn)為吸煙可能抑制SIgA合成，降低結(jié)腸粘膜免疫屏障功能，引起結(jié)腸癌。多數(shù)的報道認(rèn)為結(jié)腸癌細(xì)胞分泌SC能力與腫瘤分化程度有關(guān)。分化程度越低，分泌SC的功能越差。雙倍染色體癌細(xì)胞分泌SC的能力明顯高于多倍體癌細(xì)胞。但SC與腫瘤之間的關(guān)系及其機(jī)理都在研究中。
3．其它疾病選擇性免疫球蛋白A缺乏癥患者雖然腸粘膜中IgA產(chǎn)生細(xì)胞顯著增加（90%)，因缺乏SIgA，不能中和和或制止過敏原的吸收，易發(fā)生哮喘和食物過敏；抗原抗體復(fù)合物進(jìn)入體內(nèi)易誘發(fā)紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié) 炎和甲狀腺炎等；易m.payment-defi.com/zhicheng/引起乳糜瀉及梨形鞭毛蟲感染；致癌病毒或致癌物質(zhì)吸收增加。有人報道9例缺乏IgA患者5例發(fā)生消化道腫瘤。愛滋病患者是HIV感染所致。有人報道病人小腸末端IgA產(chǎn)生細(xì)胞減少和IgM產(chǎn)生細(xì)胞增加，明顯IgA缺乏，但在直腸沒有明顯改變。最近曾報道SC缺乏的患者發(fā)生腸道白色念珠菌感染。這種患者血清IgA含量正常，粘膜固有層IgA產(chǎn)生細(xì)胞數(shù)量不減少，但腸分泌物中SIgA缺乏�？赡苓@些IgA產(chǎn)生細(xì)胞不分泌IgA或上皮細(xì)胞的SC合成障礙。
SIgA是胃腸道粘膜第一道免疫屏障，影響因素較多。上皮細(xì)胞感染和維生素A缺乏可引起繼發(fā)性SC合成減少和SIgA轉(zhuǎn)化障礙。營養(yǎng)不良可選擇性減少IgA產(chǎn)生細(xì)胞數(shù)量。吸煙、雙苯丙酰脲等藥物、精神郁抑和劇烈運動均可能影響IgA合成。因此s IgA與疾病的內(nèi)在聯(lián)系及其機(jī)理還需進(jìn)一步深入研究。
