細(xì)胞和分子免疫學(xué):第二節(jié)　白細(xì)胞分化抗原的應(yīng)用

CD抗原及其相應(yīng)的單克隆抗體在基礎(chǔ)和臨床免疫學(xué)研究中已得到廣泛的應(yīng)用。在基礎(chǔ)免疫學(xué)研究中，CD主要應(yīng)用于：（1)CD抗原的基因克隆，新CD抗原及新配體的發(fā)現(xiàn)；（2)CD抗原結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系；（3)細(xì)胞激活途徑和膜信號(hào)的傳導(dǎo)；（4)細(xì)胞分化過程中的調(diào)控；（5)細(xì)胞亞群的功能。在臨床免疫學(xué)研究中，CD單克隆抗體可用于：（1)機(jī)體免疫功能的檢測；（2)白血病、淋巴瘤免疫分型；（3)免疫毒素用于腫瘤治療、骨髓移植以及移植排斥反應(yīng)的防治；（4)體內(nèi)免疫調(diào)節(jié)治療。有關(guān)與免疫功能相關(guān)的CD分子歸納于表1-4。有關(guān)與T細(xì)胞表面分子、B細(xì)胞表面分子以及NK細(xì)胞的表面標(biāo)記參見第七章。與CD有關(guān)的Ig超家族、粘附分子、補(bǔ)體受體、細(xì)胞因子受體等分別在本書的有關(guān)章節(jié)中加以介紹。

表1-4　與免疫功能有關(guān)的CD

一、與T細(xì)胞識(shí)別、粘附、活化有關(guān)的CD分子

T細(xì)胞是一類重要的免疫活性細(xì)胞，除直接介導(dǎo)細(xì)胞免疫功能外，對(duì)機(jī)體免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)起關(guān)鍵作用。T淋巴細(xì)胞本身的識(shí)別活化及效應(yīng)功能的發(fā)揮，不僅與外來抗原、絲裂原和多種細(xì)胞因子密切相關(guān)，而且有賴于T細(xì)胞相互之間、T細(xì)胞與抗原提呈細(xì)胞（APC)之間以及T細(xì)胞與靶細(xì)胞之間的直接接觸。T淋巴細(xì)胞識(shí)別抗原的受體是T細(xì)胞受體（t cell receptor,TCR)與CD3所組成的復(fù)合物（TCR/CD3)。在識(shí)別過程中還有賴于抗原非特異性的其它細(xì)胞表面分子的輔助，這些輔助分子（accessory molecules)主要包括CD4、CD8，MHC Ⅰ類分子、Ⅱ類分子，LFA-1（CD11a/CD18)、CD49d、e、f/CD29(VLA-4、VLA-5、VLA-6)、CD28、CD44、CD45、ICAM-1（CD54)，LFA-2（CD2)和LFA-3（CD58)等。

有關(guān)MHCⅠ類、Ⅱ類分子的結(jié)構(gòu)和功能在第六章“MHC及其臨床應(yīng)用”中討論。VLA-4、VLA-5、LFA-6、LFA-1、ICAM-1、CD44見第二章“粘附分子”。有關(guān)CD45在第八章“免疫球蛋白超家族”中闡述。

圖1-1 參與T細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞識(shí)別的分子（模式圖)

T細(xì)胞表面的輔助分子有以下特點(diǎn)：

（1)存在于T細(xì)胞上的輔助分子可特異地與存在于APC或靶細(xì)胞上的某些分子（配體)相結(jié)合，如LFA-1和CD2可分別與ICAM-1和LFA-3結(jié)合。

（2)輔助分子本身不具有多態(tài)性，在一個(gè)物種所有個(gè)體的所有T細(xì)胞的某一種輔助分子的結(jié)構(gòu)基本上是相同的。

（3)輔助分子可加強(qiáng)T細(xì)胞與APC或靶細(xì)胞結(jié)合的程度。

（4)許多輔助分子具有轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)的功能，如CD2、CD4和CD8等分子。

（5)有些輔助分子如CD2、CD4、CD8、CD28、Thy-1等其編碼的基因?qū)儆贗g基因超家族；有些輔助分子如LFA-1、VLA-4、VLA-5和VLA-6等編碼的基因?qū)儆趇ntegrin 基因超家族。

（6)T細(xì)胞膜表面輔助分子作為膜表面重要的標(biāo)記已被應(yīng)用于臨床的診斷和治療。

（7)細(xì)胞因子可調(diào)節(jié)輔助分子的表達(dá)，從而改變細(xì)胞間粘附的能力，這是細(xì)胞因子免疫調(diào)節(jié)作用的一個(gè)重要方面。

（一)T細(xì)胞受體

T細(xì)胞受體（T cell receptor,TCR或Ti)是T淋巴細(xì)胞表面識(shí)別外來抗原與自身MHc Ⅰ類抗原（或Ⅱ類抗原)復(fù)合物的受體，在同種異體移植中TCR也識(shí)別單獨(dú)的非已的MHC抗原。目前已經(jīng)證實(shí)，TCR在細(xì)胞表面與CD3密切結(jié)合在一起組成TCR/CD3復(fù)合物，TCR識(shí)別抗原后刺激信號(hào)是通過CD3分子傳遞的。

1.T細(xì)胞受體的類型和結(jié)構(gòu)　TCR中的多肽鏈?zhǔn)钱愘|(zhì)性的。根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)和編碼基因不同，已發(fā)現(xiàn)有α、β、γ和δ四種多肽鏈。關(guān)于TCR多肽鏈的結(jié)構(gòu)大多是從分析TCR多肽鏈cDNA或基因組克�。╣enomicclones)而來，編碼TCR多肽鏈的基因?qū)儆诿庖咔虻鞍谆�因超家族成員。成熟TCR肽鏈分子量在40～60kDa之間。根據(jù)TCR中異源雙體的組成的不同，TCR可分為以TCRαβ和TCRγδ兩種類型。

（1)TCRαβ：CD陽性TCRαβT細(xì)胞可識(shí)別非已MHCⅡ類抗原（同種異體抗原)或自身MHCⅡ類抗原與加工后抗原的復(fù)合物CD8陽性TCr αβT細(xì)胞則可識(shí)非已MHCⅠ類抗原或自身MHC Ⅰ類抗原與加工后抗原的復(fù)合物TCRα鏈分子量40～50kDa的酸性糖蛋白，β鏈40～50kDa不帶電或堿性糖蛋白。α和β鏈各由一個(gè)可變區(qū)（V區(qū))和一個(gè)恒定區(qū)（C區(qū))組成，與Ig的V區(qū)和C區(qū)大小相似，屬于免疫球蛋白超家族成員。TCRα、β鏈的V區(qū)約含102到109個(gè)氨基酸，在V區(qū)部分由兩個(gè)半胱氨酸形成鏈內(nèi)二硫鍵，組成約含50～60氨基酸殘基的環(huán)肽，這與IgV區(qū)結(jié)構(gòu)和功能相似，是特異性識(shí)別外來抗原的結(jié)構(gòu)域。TCRα、β鏈的C區(qū)約含138到179個(gè)氨基酸，每個(gè)C區(qū)形成由鏈內(nèi)二硫鍵連接的環(huán)肽。α、β鏈在連接肽（connectingpeptide)形成鏈間二硫鍵。穿膜區(qū)約由20～24氨基酸組成,α鏈穿膜區(qū)含有帶正電的1個(gè)賴氨酸和1個(gè)精氨酸殘基,β鏈穿膜區(qū)含有1個(gè)帶正電的賴氨酸殘基,這些帶正電的氨基酸與CD3γ、δ和ε鏈穿膜區(qū)帶負(fù)電的谷氨酸和/或天冬氨酸形成鹽橋，穩(wěn)定TCR/CD3復(fù)合物結(jié)構(gòu)，并與CD3傳遞信息有關(guān)。α、β鏈胞漿部分只有5～12氨基酸長的尾部（圖1-2)。

圖1-2 TCRαβ異源雙體模

（2)TCR γδ：TCRγ和δ鏈各包括一個(gè)Ig樣的V區(qū)和C區(qū)、連接肽、疏水的穿膜區(qū)以及一個(gè)短的胞漿區(qū)尾部，在連接肽區(qū)可形成鏈間的二硫鍵。γ和δ鏈的穿膜區(qū)各含有1個(gè)帶正電的賴氨酸，此外δ鏈還有1個(gè)帶正電的精氨酸，這些帶正電的氨基酸與CD3γ、δ和ε鏈穿膜區(qū)帶負(fù)電的天冬氨酸或谷氨酸形成鹽橋。在氨基酸水平上分析，TCRγ鏈與β鏈同源性較高，而TCRδ鏈與α鏈同源性較高。在人類TCRγδ有二硫鍵相連和非共價(jià)相連兩種形式，而在小鼠只發(fā)現(xiàn)二硫鍵相連的TCRγδ形式。人γ鏈分子量為36～55kKa，δ鏈為40～60kDa，γ、δ鏈的分子量大小取決于多肽骨架的長度和糖基化的程度。

有關(guān)TCRα、β、γ、δ鏈基因的結(jié)構(gòu)和重排見第三章“免疫球蛋白超家族”

2.兩種類型TCR T細(xì)胞的比較　TCRαβ與TCRγδ不僅組成受體多肽鏈的結(jié)構(gòu)不同，而且具有這兩種類型受體T細(xì)胞的分布、表型、發(fā)育以及功能也有差別（表1-5)。

表1-5　TCRαβ與TCRγδ細(xì)胞特性的比較

注：樹突狀表皮細(xì)胞dendriticepidermal cell, DEC
上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞intraepithelial lymphocyte　IEL

在正常外周血中，CD4-CD8+、CD4+CD8-、CD4+CD8+和CD4-CD8-四種表型不同的T細(xì)胞分別占T細(xì)胞總數(shù)的25%、70%、1%和4%左右，其中前三種表型TCR類型主要為TCRαβ，而CD4-CD8-T細(xì)胞主要為TCRγδ。以下疾病可見外周血或局部TCRγδ細(xì)胞數(shù)量或比率升高：（1)重癥聯(lián)合免疫缺陷、常見可變型免疫缺陷、Wiskott-Aldrich綜合征、Di-George綜合征、白血病患者骨髓移植等病人外周血中TCRγδ細(xì)胞百分率增加；（2)少數(shù)急性T細(xì)胞白血病、T細(xì)胞惡性淋巴瘤患者為TCRγδT細(xì)胞發(fā)生惡性變；（3)慢性淋巴細(xì)胞性白血病、大顆粒淋巴細(xì)胞（LGL)白血病病人PBMC中TCRγδT細(xì)胞百分率增加；（4)腎移植患者排異反應(yīng)晚期外周血中TCRγδ細(xì)胞增加；（5)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)腔滑液中TCRγδ陽性細(xì)胞比率要高于外周血中TCRγδ細(xì)胞比例，推測TCRγδ可能參與局部炎癥的發(fā)生；（6)經(jīng)結(jié)核桿菌免疫后的局部淋巴引流液中TCRγδT細(xì)胞比例增加，麻風(fēng)結(jié)節(jié)病灶中有很高比例的TCRγδT細(xì)胞，提示TCRγδT細(xì)胞對(duì)分枝桿菌所致的感染免疫中起重要作用；（7)HIV、EBV感染時(shí)外周血TCRγδT細(xì)胞比例增加。

[超搞原]有的抗原不經(jīng)過APC處理和遞呈可直接激活CD4陽性T細(xì)胞稱為超抗原（superantigen,SAg),具有類似致分裂原的作用。SAg對(duì)T細(xì)胞的激活采取一種獨(dú)特的方式，即分子一端和TCRβ鏈上V基因產(chǎn)物結(jié)合，別一端和APC表面MHCⅡ類分子相結(jié)合。因此SAg發(fā)揮作用需有兩類細(xì)胞：表達(dá)TCRβ鏈的CD4+T細(xì)胞和表達(dá)MHCⅡ類抗原的輔佐細(xì)胞。外源性的SAg主要是葡萄菌、鏈球菌、支原體等微生物產(chǎn)生的毒素，其中以葡萄球菌腸毒素A（Staphylococcus enterotoxin A,SEA)研究得最多，SEA往往取用特定TCR基因片段Vβ6.9及Vβ22，SEA另一側(cè)與HLA-DR分子β1結(jié)構(gòu)域的α螺旋相結(jié)合。

SAg激活CD4+T細(xì)胞使之釋放IL-2，IFN、TNF等細(xì)胞因子，誘導(dǎo)CTL分化為效應(yīng)細(xì)胞，可殺傷對(duì)NK、LAK高度抵抗的白血病細(xì)胞。

（二)CD3（T3、Leu4)

CD3分子分布于成熟T淋巴細(xì)胞表面，至少由γ、δ、ε、ζ、η5種多肽鏈組成，與T細(xì)胞抗原受體非共價(jià)連接（圖1-3)。CD3單克隆抗體可誘導(dǎo)CD3多肽和TCR共帽形成（co-capping)，并誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞活化。TCR識(shí)別外來抗原與自身MHC分子形成的復(fù)合物，CD3對(duì)于信號(hào)的傳遞具有重要作用。

圖1-3 TCR/CD3結(jié)構(gòu)模式圖

T細(xì)胞在胸腺發(fā)育過程中，CD3γ、δ和ε基因的表達(dá)要早于TCRα、β鏈基因的表達(dá)。CD3γ、δ和ε基因產(chǎn)物通過翻譯后的修飾形成核心結(jié)構(gòu)，在內(nèi)織網(wǎng)處，此核心結(jié)構(gòu)與TCRαβ異源雙體形成復(fù)合物后轉(zhuǎn)移到高爾基氏體，進(jìn)行N連接的糖基化。ζ-ζ同源雙體與TCRαβ/CD3γδεε結(jié)合后組成一個(gè)完整的復(fù)合物TCRαβ/CD3γδεεζζ（少婁分子為TCRαβ/CD3γδεεζη)。最近發(fā)現(xiàn)一個(gè)分子量為28kDa的ω連或T細(xì)胞受體相關(guān)蛋白（t cell receptor associated protein,TRAP),可能具有控制TCR/CD3復(fù)合物在內(nèi)織網(wǎng)中裝配和轉(zhuǎn)移的功能，但確切的機(jī)理尚不明了。ω鏈不表達(dá)于細(xì)胞膜表面。

圖1-4 TCR/CD3復(fù)合物模式圖

1.CD3γ、δ和ε鏈　CD3γ、δ和ε鏈基因有高度的同源性，在人類位于第11號(hào)染色體，小鼠9號(hào)染色體，這三種鏈的基因可能從一個(gè)祖先基因通過基因復(fù)制而來。CD3γ、δ和ε鏈在細(xì)胞膜外都有一個(gè)Ig樣結(jié)構(gòu)域（C2)，都屬于免疫球蛋白超家族，但不存在多態(tài)性或可變性，因此不直接參與特異性識(shí)別抗原。γ、δ和ε鏈的穿膜部分含有帶負(fù)電谷氨酸和/或天冬氨酸殘基，這與TCRα、δ鏈穿膜區(qū)中帶正電賴氨酸、精氨酸以及β、γ鏈穿膜區(qū)中的賴氨酸相互作用有重要作用。γ、δ和ε鏈胞漿部分含44到81氨基酸殘基，提供了把信息傳導(dǎo)到細(xì)胞內(nèi)的條件。γ鏈分子量為25～28kKa，有2個(gè)糖基化點(diǎn)，氨基端89個(gè)氨基酸殘基為親水性，組成胞膜外區(qū)，穿膜區(qū)含27個(gè)氨基酸殘基，胞漿內(nèi)區(qū)44氨基酸殘基，胞漿內(nèi)113位絲氨酸殘基可能是磷酸化位點(diǎn)。δ鏈分子量為20kDa，含有2個(gè)糖基化點(diǎn)，胞漿內(nèi)126位絲氨酸可能是磷酸化位點(diǎn)。CD3δ鏈抗體能非特異性地活化T細(xì)胞，促進(jìn)T細(xì)胞有絲分裂。ε鏈分子量為20kDa包括氨基端104親水氨基酸的胞膜外區(qū)，穿膜區(qū)26個(gè)氨基酸殘基，胞漿內(nèi)區(qū)81個(gè)氨基酸殘基。目前所制備的單克隆抗體中大部分是針對(duì)CD3ε鏈。

2.CD3ζ和η　ζ（zeta)和η（eta)鏈結(jié)構(gòu)相似，而與CD3γ、δ和ε鏈無同源性。ζ和η鏈分子量分別為16kDa和21kDa，它們的胞膜外以及穿膜區(qū)和結(jié)構(gòu)相似，但有胞漿區(qū)不同。胞膜外區(qū)很短，只有9個(gè)氨基酸殘基，含有半胱氨酸，ζζ之間或ζη之間形成二硫鍵。ζ和η鏈穿膜部分各有一個(gè)帶負(fù)電的天冬氨酸。ζ和η鏈胞漿內(nèi)區(qū)分別有113個(gè)和155個(gè)氨基酸殘基，具有多個(gè)酪氨酸磷酸化的位點(diǎn)。最近研究證實(shí)，CD3ζ鏈可能與NK細(xì)胞上Fcγ受體相連。此外，ζ鏈與FcεRⅠγ亞單位有很高的同源性。

CD3γ、δ和ε鏈?zhǔn)菃捂湥�而ζ則以ζ-ζ同源雙體存在于80～90%T細(xì)胞中，有10～20%T細(xì)胞則以ζ-η異源雙體存在。因此最常見的TCR/CD3復(fù)合物的組成形式是TCRαβ/CD3γδεεζζ。

在體外，抗CD3McAb可促進(jìn)T細(xì)胞表達(dá)IL-2R，產(chǎn)生IL-2、TNF-α、TNE-β、IFN-γ和IL-4等多種細(xì)胞因子，誘導(dǎo)非MHC限制的細(xì)胞毒作用，增強(qiáng)T細(xì)胞、LAK和NK細(xì)胞的殺傷腫瘤作用。

1986年美國FDA已批準(zhǔn)應(yīng)用小鼠抗CD3 McAb治療急性腎移植排斥反應(yīng)。CD3McAb治療心、肝移植排斥反應(yīng)已完成Ⅲ期臨床試驗(yàn)，正申請(qǐng)投放市場。

（三)CD4

CD4和CD8分子分別與MHCⅡ類和Ⅰ類抗原結(jié)合，不僅可增強(qiáng)T淋m.payment-defi.com/wsj/巴細(xì)胞與APC或靶細(xì)胞結(jié)合的程度，而且與刺激信號(hào)的傳遞有關(guān)。CD4陽性細(xì)胞是MHCⅡ類抗原限制的細(xì)胞群，CD8陽性細(xì)胞是MHCⅠ類抗原限制的細(xì)胞群。有關(guān)CD4和CD8抗原在胸腺細(xì)胞分化過程中的變化以及CD4、CD8T細(xì)胞亞群見第七章“淋巴細(xì)胞群及其亞群”。

1.CD4分子的結(jié)構(gòu)　為細(xì)胞膜表面單鏈糖蛋白，人CD4分子由458個(gè)氨基酸殘基組成，包括信號(hào)肽23氨基酸殘基，胞膜外區(qū)374個(gè)氨基酸殘基，含2個(gè)糖基化點(diǎn)，穿膜區(qū)21氨基酸殘基，胞漿內(nèi)區(qū)含有40氨基酸殘基。胞膜外區(qū)具有4個(gè)IgV樣結(jié)構(gòu)域，屬免疫球蛋白超家族成員。

圖1-5 CD4分子結(jié)構(gòu)模式圖

第一個(gè)V樣區(qū)與Igκ鏈的V區(qū)有很高同源性，有3個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)（complementarity-determining region, CDR)。其余3個(gè)V樣區(qū)功能區(qū)與Poly IgR的同源性最接近，其中第2和4個(gè)V樣區(qū)中兩個(gè)半胱氨酸的距離分別為28和42個(gè)氨基酸殘基，第3個(gè)V樣區(qū)無二硫鍵。CD4跨膜區(qū)與MHCⅡ類分子β鏈的跨膜區(qū)高度同源。編碼人CD4基因位于第2號(hào)染色體，小鼠第6號(hào)染色體，小鼠CD4分子的分子量為55kDa，由457個(gè)氨基酸殘基組成，信號(hào)肽有22個(gè)氨基酸殘基，N端功能區(qū)110個(gè)，胞膜外還有一個(gè)長序列（long sequence)的區(qū)域，含262氨基酸殘基，有4個(gè)糖基化點(diǎn)，穿膜區(qū)25氨基酸殘基，胞漿內(nèi)區(qū)含38個(gè)氨基酸殘基。人和小鼠CD4分子約有55%序列相同，尤以胞漿內(nèi)區(qū)為顯。在胞漿部位有3個(gè)絲氨酸殘基，可能作為PKC磷酸化的底物。CD4胞漿部分功能區(qū)高度的保守性表明這一區(qū)域的功能是重要的。

2.CD4分子的分布　分布于部分T淋巴細(xì)胞和胸腺細(xì)胞表面，也發(fā)現(xiàn)于某些B淋巴細(xì)胞、EBV轉(zhuǎn)化和B細(xì)胞、單核吞噬細(xì)胞和腦細(xì)胞。在人類，OKT4和Leu3McAb可檢測CD4抗原。小鼠L3T4是人OKT4的類同物。

3.CD4分子的功能　在成熟的胸腺細(xì)胞、外周血和周圍淋巴器官中，CD4陽性細(xì)胞一般為輔助性T淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞/抑制性T淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞（helper inducer/suppressor inducer)。

(1)作為細(xì)胞與細(xì)胞之間的粘附分子：CD4第1、2功能區(qū)與MHCⅡ類分子的非多態(tài)部分結(jié)合以穩(wěn)定MHCⅡ類分子限制的T細(xì)胞與帶有MHCⅡ類分子與抗原復(fù)合物的APC細(xì)胞相互作用�？笴D4McAb可封閉T細(xì)胞的輔助活性。

（2)轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)：CD4分子胞漿區(qū)與蛋白酪氨酸激酶p56^lck相聯(lián)，對(duì)T細(xì)胞信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)起重要作用（詳見第八章)。

CD4分子胞膜外第1個(gè)結(jié)構(gòu)區(qū)域是HIV外殼蛋白gp120的識(shí)別部位，其中CDR2與gp120結(jié)合的親合力最高，CDR3可能與HIV感染靶細(xì)胞膜融合有關(guān)�？扇苄� gp120結(jié)合到CD4的反應(yīng)可被下列試劑所阻斷：（1)針對(duì)CD4V1區(qū)中CDR2、CDR3的McAb；（2)CDR2、CDR3肽段；（3)可溶性CD4 V1肽段；（4)抗gp120抗體。HIV感染機(jī)體可引起選擇性CD4+細(xì)胞的數(shù)量減少和功能降低，主要通過以下不同的機(jī)理：（1)HIVgp120與T細(xì)胞表面CD4分子結(jié)合后通過病毒芽生破壞細(xì)胞膜，在感染細(xì)胞漿內(nèi)產(chǎn)生大量非整合的病毒RNA直接損傷細(xì)胞膜、干擾細(xì)胞代謝，影響CD4分子在細(xì)胞膜上的表達(dá)以及形成短命的合胞體；（2)阻斷CD4+T細(xì)胞與Mψ細(xì)胞表面MHCⅡ類抗原的結(jié)合，影響Th細(xì)胞對(duì)抗原的識(shí)別過程；（3)產(chǎn)生抗體損傷CD4細(xì)胞，機(jī)體產(chǎn)生抗gp120或其他HIV成份的抗體，通過激活補(bǔ)體或ADCC效應(yīng)損傷CD4陽性細(xì)胞；（4)特異性CTL也可通過識(shí)別CD4細(xì)胞表面的gp120分子而殺傷CD4陽性細(xì)胞。最近發(fā)現(xiàn)，CD26可能是HIV的另一類受體。

應(yīng)用基因工程生產(chǎn)的重組可溶性CD4（rsCD4)治療ARC（AIDsrelated complexes)、艾滋病正在進(jìn)行Ⅱ期臨床試驗(yàn)；抗CD4McAb（Leu3a)也已開始治療HIV感染的I期臨床試驗(yàn)。此外，應(yīng)用CD4-IgG、CD4-PE（綠膿桿菌外毒素)、CD4-RA（蓖麻毒毒A)等雜交分子殺傷HIV感染的T細(xì)胞，作為抗愛滋病的新藥也已進(jìn)入臨床驗(yàn)證。1991年美國風(fēng)濕病學(xué)年會(huì)上報(bào)道了用抗CD4McAb治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA)，經(jīng)治療后臨床癥狀明顯改善，PBMC中CD4陽性細(xì)胞的比例和CD4抗原密度明顯下降，血清可溶性CD4（sCD4)水平明顯升高，血沉、CRP、RF、和總免疫球蛋白水平明顯降低�？笴D4嵌合抗體（Centocor公司)治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化癥也已進(jìn)入Ⅱ期臨床驗(yàn)證。抗CD4McAb（Ortho Biotech公司)預(yù)防器官移植排斥反應(yīng)已開始臨床驗(yàn)證。

（四)CD8

1.CD8分子的結(jié)構(gòu)　CD8分子是由α、β兩條多肽鏈組成的穿膜糖蛋白，α鏈分子量34kDa，相當(dāng)于小鼠的Lyt-2;β鏈30kDa，相當(dāng)于小鼠的Lyt-3。每條鏈各包括1個(gè)IgV樣結(jié)構(gòu)域、連接肽、穿膜區(qū)和胞漿區(qū)。α和β鏈在連接肽處有二硫鍵相連。部分CD8分子是由同源α鏈雙體（α/α)組成，如在CD8陽性的TCRγδT細(xì)胞表面。有報(bào)道胸腺細(xì)胞上的CD8可能為四聚體。CD8α和β鏈IgV樣區(qū)約含110氨基酸殘基，與Igκ、λ輕鏈的V區(qū)有30～35%同源性，與V有20～22%同源性，與TCr Vα和Vβ有24%同源性。編碼CD8α、β鏈的基因?qū)買g基因超家族成員，與編碼Igκ鏈基因密切連鎖，定位于第2號(hào)染色體，表達(dá)前不需要重排。編碼小鼠Lyt-2和Lyt -3基因定位于第6號(hào)染色體，各有二個(gè)等位基Ly2a、Ly2b和Ly3a、Ly3b,分別編碼Lyt-2.1、Lyt-2.2和Lyt-3.1和Lyt-3.2。

圖1-6 CD8分子結(jié)構(gòu)模式圖

2.CD8分子的分布　分布于部分T淋巴細(xì)胞和胸腺細(xì)胞。在異基因骨髓移植病人中可出現(xiàn)TCRγδCD8α/α表型的T細(xì)胞。NK細(xì)胞表面的CD8分子為α/α二聚體。

最近發(fā)現(xiàn)，通過細(xì)胞分泌或/和胞膜外分子脫落的機(jī)制，在血清中存在著可溶性CD8分子（sCD8)。白血病、何杰金氏病、艾滋病、急性傳染性單核細(xì)胞增多癥、再生障礙性貧血、同種異體移植、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和全身性紅斑狼瘡等患者血清中sCD8水平增高，其升高的水平與疾病的嚴(yán)重程度、病情變化、治療反應(yīng)以及預(yù)后有較密切的關(guān)系。

3.CD8分子的功能

（1)作為細(xì)胞與細(xì)胞間的附粘分子MHCⅠ類抗原是CD8分子的配體。CD8分子與MHCⅠ類分子結(jié)合可以穩(wěn)定MHCⅠ類分子限制的T細(xì)胞（主要是CTL)與帶有MHCⅠ類分子與抗原復(fù)合物的靶細(xì)胞結(jié)合。CD8陽性細(xì)胞為抑制性T淋巴細(xì)胞/殺傷性T淋巴細(xì)胞（suppressor T lymphocyte/cytotoxic Tlymphocyte,Ts/Tc)。T8、Leu2 McAb識(shí)別CD8α鏈，可封閉Tc的活性。

（2)轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)，目前發(fā)現(xiàn)CD8也與蛋白酪氨酸激酶p56^lck相關(guān)。在T細(xì)胞增殖和分化的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起重要作用。

抗CD8McAb可預(yù)防骨髓移植時(shí)移植物抗宿主反應(yīng)，美國Becton-Dicknson公司生產(chǎn)Leu2已進(jìn)入Ⅱ期臨床驗(yàn)證。

（五)CD2

1.CD2分子的結(jié)構(gòu)和分布　CD2分子又稱T11、綿羊紅細(xì)胞受體（ER)、淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2（LFA-2)和Leu5，是人T淋巴細(xì)胞表面的單鏈糖蛋白，分子量50kDa，CD2基因定位于第1號(hào)染色體，屬免疫球蛋白基因超家族。編碼351氨基酸殘基，包括先導(dǎo)序列24氨基酸殘基，2個(gè)胞外功能區(qū)（C2)共185氨基酸殘基，有3個(gè)糖基化位點(diǎn)，穿膜區(qū)和胞漿部分分別為26和116個(gè)氨基酸殘基，胞漿區(qū)富含肺氨酸和堿性氨基酸，胞漿區(qū)與活化信號(hào)的傳遞可能有關(guān)。在DNA水平上人和小鼠CD2有51%同源性。CD2分子分布于95%的T細(xì)胞、50～70%胸腺細(xì)胞和大顆粒淋巴細(xì)胞（LGL/NK)。

2.CD2分子的功能

（1)粘附功能：CD2分子的配體是LFA-3，后者分布于多種細(xì)胞表面。CD2陽性T細(xì)胞可結(jié)合含有純化LFA-3的脂質(zhì)體。CD2分子的功能主要是通過抗CD2McAb對(duì)淋巴細(xì)胞功能的影響和基因轉(zhuǎn)染技術(shù)來研究的。用抗CD2McAb可（1)抑制lectin、同種異體抗原、可溶性抗原等誘導(dǎo)T細(xì)胞的增殖反應(yīng)；（2)抑制T淋巴細(xì)胞IL-2合成和分泌；（3)抑制CTL效應(yīng)相殺傷功能和NK細(xì)胞的殺傷活性。CTL與靶細(xì)胞之間的抗原非特異性粘附有多種途徑，如CD2與LFA-３結(jié)合，LFA-1與ICAM-1結(jié)合。用抗CD2和抗LFA-1兩種抗體，或抗LFA-1和抗LFA-3兩種抗體可完全抑制抗原非特異性粘附作用，而抗CD2與抗LFA-3兩種抗體只能部分抑制這種粘附作用。CD2與LFA-3之間的粘附功能對(duì)于T淋巴細(xì)胞TCR識(shí)別外來抗原與APC細(xì)胞表面MHC抗原復(fù)合物、腫瘤抗原、病毒感染靶細(xì)胞以及同種異體抗原均有重要的輔助作用。最近研究表明，CD48和CD59也是CD2的配體，參與T細(xì)胞的粘附和細(xì)胞間的相互作用。

（2)T細(xì)胞旁路激活途徑（the alternative pathway of T cellactivation): Reinherz成功地制備了識(shí)別了CD2三個(gè)不同表位的McAbs：（1)T11₁與LFA-3（CD58)的結(jié)合有關(guān)，由于綿羊紅細(xì)胞SRBC表達(dá)CD58的同源物，T11₁可與SRBC結(jié)合形成E花環(huán)，抗T11₁McAb可抑制E花環(huán)形成；（2)T11₂與CD58結(jié)合無關(guān)，抗T11₂McAb可誘導(dǎo)T11₃表位出現(xiàn)；（3)T11₃是活化T細(xì)胞表達(dá)的表位（已命名為CD2R)，在誘導(dǎo)T11₃表位出現(xiàn)的過程中，加入蛋白質(zhì)合成抑制劑T11₃仍能表達(dá)，表明T11₃出現(xiàn)并非是一種新合成的蛋白質(zhì)，而是由于活化后構(gòu)型變化暴露出來的表位。同時(shí)加入抗T11₂和T11₃McAbs可活化T淋巴細(xì)胞，促進(jìn)MHCⅡ類抗原和IL-2受體的表達(dá)，并在IL-2受體的表達(dá)，并在IL-2存在條件下，活化的T細(xì)胞繼續(xù)增殖，稱為T細(xì)胞旁路激活途徑。T113McAb與表達(dá)IL-3的SRBC同T細(xì)胞一起孵育，也能刺激T細(xì)胞增殖。CD3陰性的胸腺細(xì)胞和NK細(xì)胞可因CD2而活化，此外，CD2可以與其它膜分子如CD44、CD45的功能有關(guān)。

目前關(guān)于CD2活化的生理學(xué)意義還不十分清楚，CD2陽性胸腺細(xì)胞可與LFA-3陽性的胸腺上皮細(xì)胞結(jié)合，在胸腺微環(huán)境的調(diào)節(jié)下，可能為早期胸腺細(xì)胞的活化提供信號(hào)，并與胸腺細(xì)胞的增殖和分化有關(guān)。

（六)CD58（LFA-3)

1.LFA-3分子的結(jié)構(gòu)　淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原-3（lymphocyte functionassociated antigen-3,LFA-3)（CD58)是細(xì)胞表面糖蛋白，分子量55～70kDa，屬免疫球蛋白超家族成員，與CD2分子高度同源，胞膜外區(qū)有2個(gè)Ig超家族C2樣區(qū)。CD2和CD58基因都定位于1號(hào)染色體，并密切連鎖，可能是從同一個(gè)基因復(fù)制而來。CD2和CD58的結(jié)合是屬于嗜同種的相互作用（homophilic interaction)。

2.LFA-3分子的分布　分布于T細(xì)胞、B細(xì)胞、單核細(xì)胞、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、結(jié)締組織、成纖維細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和血小板表面。

3.LFA-3分子的功能　LFA-3分子的功能主要是通過應(yīng)用相應(yīng)的McAb而得知，抗LFA-3抗體可（1)抑制效應(yīng)相CTL的活性，可能與抑制CTL與靶細(xì)胞之間的粘附有關(guān)；（2)抑制lectin、同種異體抗原誘導(dǎo)的T細(xì)胞增殖反應(yīng)。在EB病毒感染的Burkitt氏淋巴瘤細(xì)胞株中，發(fā)現(xiàn)有的腫瘤細(xì)胞由于缺乏LFA-3的表達(dá)而抵抗CTL的殺傷作用，提示LFA-3缺損的腫瘤細(xì)胞可能與逃逸機(jī)體的免疫監(jiān)視有關(guān)。發(fā)作性夜間血紅素尿癥（paroxysmalmocturnal hemoglobinuria,PNH)患者紅細(xì)胞表面缺乏LFA-3、DAF和FcγRⅢ。

LFA-3以兩種形式存在于細(xì)胞膜表面：（1)穿膜形式，胞膜外區(qū)、穿膜區(qū)和胞漿區(qū)分別為188、23和12個(gè)氨基酸；（2)GPI“錨”形式，如EBV轉(zhuǎn)化的JYB細(xì)胞系細(xì)胞表面LFA-3分子具有穿膜和GPI“錨”兩種形式。

[GPI“錨”]糖基磷脂酰肌醇（glycosylphosphatidylinsitol,GPI)是質(zhì)膜的組成成分，GPI骨架上的乙醇胺通過酰胺鍵固定于蛋白質(zhì)的羧基端，成為蛋白質(zhì)定位于細(xì)胞膜上的錨，這種結(jié)合到GPI的蛋白質(zhì)即稱為GPI錨蛋白。去污劑溶解脂質(zhì)雙層可獲得結(jié)合在GPI上的蛋白質(zhì)，磷脂酶C（PLC)可從細(xì)胞表面將糖一肌醇磷脂錨連的蛋白質(zhì)釋放出來，磷脂酰肌醇經(jīng)PLC降解后所產(chǎn)生的三磷酸肌醇（IP3)和二�；�甘油（DG)是重要的第二信使。

（七)CD28

1.CD28分子的結(jié)構(gòu)　1980年Hara等首先用單克隆抗體9.3發(fā)現(xiàn)了CD28。CD28由兩條44kDa多肽借二硫鍵組成的同源二聚體，分子量為90kDa。成熟的人CD28分子單肽鏈有202個(gè)氨基酸，基中胞膜外區(qū)有134氨基酸，屬免疫球蛋白超家族成員，有一個(gè)IgV樣區(qū)。人與小鼠CD28分子的同源性為68%。CD28與CTLA-4分子有高度同源，后者主要表達(dá)于活化的CTL細(xì)胞表面。

2.CD28分子的分布　在外周血淋巴細(xì)胞，CD28+細(xì)胞占54～86%，其中90%CD4+T細(xì)胞和50%CD8+T細(xì)胞表達(dá)CD28。CD28在CD28+T細(xì)胞中表達(dá)與功能有一定的關(guān)系，CD8+CD28+T細(xì)胞表現(xiàn)出MHC限制的細(xì)胞毒功能，而CD8+CD28-細(xì)胞可抑制抗體產(chǎn)生以及同種異體抗原所誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖效應(yīng)。此外，漿細(xì)胞瘤及部分活化B細(xì)胞也可表達(dá)CD28。

圖1-7 CD28與CD80分子相互作用示意圖

3.CD28分子的功能

（1)T細(xì)胞活化的輔助信號(hào)：抗CD28可加強(qiáng)PHA、ConA、抗CD2McAb、抗CD3McAb等增殖、活化的效應(yīng)，增加IL-2、IL-3、TNF-α、IFN-β、GM-γ、GM-CSF等細(xì)胞因子產(chǎn)生，激活CTL細(xì)胞。此外，抗CD28McAb可誘導(dǎo)T細(xì)胞IL-13mRNA的表達(dá)。

（2)CD28的天然配體是B細(xì)胞活化抗原B7/BB1（CD80)，CD28與CD80的結(jié)合是T-B細(xì)胞相互協(xié)作的主要方式，并刺激B細(xì)胞活化。

二、與B細(xì)胞識(shí)別、粘附、活化有關(guān)的CD分子

（一)BCR復(fù)合物

B細(xì)胞抗原受體（B cellreceptor,BCR)復(fù)合物至少由四種不同的多肽鏈組成，抗原結(jié)合部位是由重鏈和輕鏈構(gòu)成的膜表面Ig的四鏈結(jié)構(gòu)，此外，在BCR中還含有Igα和Igβ兩種多肽鏈，最近在白細(xì)胞分化抗原國際專題討論會(huì)中分別命名為CD79a和CD79b。在人類B細(xì)胞，與mIgM相關(guān)的Igα和Igβ分別為47kDa和37kDa糖蛋白，屬于免疫球蛋白超家族成員，編碼Igα和Igβ的基因分別稱為mb-1和B29。Igα和Igβ胞膜外區(qū)氨基端處均有一個(gè)Ig樣結(jié)構(gòu)域。Igα和Igβ均可作為蛋白酪氨酸激酶的底物，可能與BCR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)，因?yàn)閙IgM和mIgD胞漿區(qū)只有3個(gè)氨基酸（KVK)，不可能單獨(dú)把胞膜外的刺激信號(hào)傳遞到細(xì)胞內(nèi)。Igα和Igβ胞漿部分尾部有6個(gè)保守的氨基酸殘基，可能以磷酸化形式與胞漿中不同酶中存在的SH2（src-homology2)結(jié)構(gòu)域結(jié)合。

（二)CD19

CD19是一種屬于Ig超家族成員、分子量為95kDa的穿膜糖蛋白，分布于B細(xì)胞表面，其相應(yīng)的生理性配體尚不清楚。CD19與B細(xì)胞活化和信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)：（1)CD19單克隆抗體可誘導(dǎo)胞漿內(nèi)多種底物迅速發(fā)生磷酸化；（2)CD19胞漿區(qū)可被一種絲氨酸激酶催化而發(fā)生磷酸化；（3)CD19胞漿區(qū)與src激酶家族Lyn穩(wěn)定的結(jié)合。最近提出一個(gè)B細(xì)胞最佳信號(hào)放大的雙重抗原結(jié)合模型，這個(gè)模式認(rèn)為B淋巴細(xì)胞BCR/Igα、Igβ與抗原結(jié)合后，使CD19與CD21相互接近形成復(fù)合物，外來抗原及包裹抗原的C3dg分別被BCR和CD21所結(jié)合，后者激活CD19/CD21復(fù)合物中與CD19緊密結(jié)合的src家族Lyn，而使CD19分子胞漿內(nèi)酪氨酸發(fā)生磷酸化，有關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程參見第八章“淋巴細(xì)胞活化過程中信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的分子基礎(chǔ)”。

（三)CD21

CD21又稱2型補(bǔ)體受體（complementreceptor type 2,CR2)和EB病毒受體，是補(bǔ)體激活調(diào)節(jié)劑家族的一員。

[補(bǔ)體激活調(diào)節(jié)劑]補(bǔ)體激活調(diào)節(jié)劑（regulatorsof complement activation,RCA)家族包括2個(gè)血漿蛋白H因子和C4bp以及4個(gè)膜蛋白CR1、CR2、DAF和MCP。RCA的特點(diǎn)是：（1)含有60～70個(gè)氨基酸組成的短同源重復(fù)順序（short consensus repeat ,SCR);(2)結(jié)合補(bǔ)體活化裂解片段C3b和C4b；（3)基因定位于染色體1q32處，其基因以MCP-CR1-CR2-DAF-C4bp形式相連鎖。

1.CD21分子的結(jié)構(gòu)　為分子量140kDa的單鏈糖蛋白，N端在細(xì)胞外，胞膜外區(qū)1005個(gè)氨基酸，疏水跨膜區(qū)28個(gè)氨基酸，富含堿性氨基酸，胞漿區(qū)34個(gè)氨基酸。胞膜外區(qū)組成15個(gè)SCR，每個(gè)SCR含有60～70氨基酸，有一個(gè)含4個(gè)Cys的骨架結(jié)構(gòu)，C1-C4、C2-C3間形成兩個(gè)二硫鍵，構(gòu)成一個(gè)SCR球狀結(jié)構(gòu)，SCR1-2與C3dg包裹的顆粒和EBV結(jié)合有關(guān)，胞膜外區(qū)有10個(gè)（或12個(gè))N-糖鍵。胞漿區(qū)有10個(gè)可能磷酸化為位點(diǎn)。

2.CD21的分布　主要分布在成熟的B細(xì)胞、淋巴濾泡內(nèi)樹突狀細(xì)胞、部分T細(xì)胞，此外，口咽、鼻咽以及宮頸上皮細(xì)胞表達(dá)與CD21相關(guān)的145kDa分子。

3.CD21的功能

（1)促進(jìn)B細(xì)胞增殖：單獨(dú)CD21交聯(lián)并不引起B(yǎng)細(xì)胞的增殖，在T細(xì)胞或T細(xì)胞源性低分子量B細(xì)胞生長因子（LMW-BCGF)存在下，或抗μ鏈抗體激活B細(xì)胞增殖時(shí)，CD21交聯(lián)具有強(qiáng)烈的促進(jìn)作用；聚合的C3dg、UV-EBV、CD21單抗可加強(qiáng)TPA刺激的B細(xì)胞增殖；在LMW-BCGF存在下，CD21單抗可刺激B細(xì)胞增殖；C3dg包裹的顆�？梢�起LPS激活的小鼠B細(xì)胞連續(xù)增殖；可溶性入C3dg誘導(dǎo)Raji細(xì)胞不信賴血清的增殖。上述結(jié)果提示外周血B細(xì)胞被某些刺激物刺激后，CD21介導(dǎo)增殖信號(hào)促進(jìn)B細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞周期。最近發(fā)現(xiàn)CD23是CD21的一個(gè)新的配體。sCD23在體外促進(jìn)IgE生成，并有BCGF樣作用，CD23分子能與CD21結(jié)合，推測CD21就是生長因子BCGF的受體。

（2)CD21介導(dǎo)EBV轉(zhuǎn)化B細(xì)胞：EBV與CD21（CR2)結(jié)合后激活磷脂酶C，水解磷脂酰肌醇，胞漿內(nèi)Ca²⁺和二�；�甘油水平增加，并活化鈣調(diào)蛋白和PKC。轉(zhuǎn)化性EBV（如B95-8)感染B細(xì)胞后，編碼反式激活蛋白（transactivator)EBNA2、LMP激活CD21和CD23基因，導(dǎo)致B細(xì)胞持續(xù)高水平表達(dá)CD21和CD23，CD23脫落后形成sCD23是自分泌的BCGF，與CD21結(jié)合并活化CD21分子的酪氨酸蛋白激酶，不斷激活PKC，從而導(dǎo)致B細(xì)胞的轉(zhuǎn)化和增殖。

（3)CD21參與免疫記憶：病原微生物或蛋白質(zhì)抗原上覆蓋有C3dg時(shí)，可與淋巴濾泡內(nèi)樹突狀細(xì)胞表面CD21結(jié)合，在誘導(dǎo)免疫記憶過程中起重要作用。

（4)參與補(bǔ)體的活化：CD21參與補(bǔ)體替代途徑的啟動(dòng)以及C3b的固定，且在C3bi裂解為C3dg過程中為絲氨酸蛋白酶Ⅰ因子的輔因子。

（四)CD80（B7/BB1)

CD80cDNA已克隆成功，成熟的CD80分子由262氨斟酸組成，胞膜外區(qū)216個(gè)氨基酸，穿膜區(qū)2m.payment-defi.com/job/7氨基酸，胞漿區(qū)19氨基酸。B7和BB1分子量分別為44kDa和46kDa，其分子量的差異是由同一核心多肽糖基化程度不同所造成。CD80屬免疫球蛋白超家族成員，是B細(xì)胞活化抗原，IFN-γ活化的單核細(xì)胞也表達(dá)CD80。CD28是CD80的配體，CD28與CD80的結(jié)合可同時(shí)引起T細(xì)胞和B細(xì)胞的活化，在T、B細(xì)胞協(xié)作中發(fā)揮重要作用。

三、免疫球蛋白Fc段受體

Ig根據(jù)其重鏈抗原性的差異分為IgM、IgG、IgA、IgD和IgE五類，各類Ig的不同功能主要與其結(jié)構(gòu)有關(guān)。機(jī)體內(nèi)許多細(xì)胞表面具有不同類Ig Fc的受體，通過Fc受體與Ig Fc的結(jié)合，參與Ig介導(dǎo)的生理功能或病理損傷過程。目前已鑒定明確屬于CD抗原的Fc受體有FcγR、FcαR、FcεR。

（一)FcγR（CD64、CD32、CD16)

1.FcγR的結(jié)構(gòu)和分布　FcγR可分為FcγRⅠ、FcγRⅡ和FcγRⅢ三類，它們的結(jié)構(gòu)和分布有所不同。

（1)FcγRⅠ（CD64)：70kDa穿膜糖蛋白，屬Ig超家族成員，胞膜外區(qū)有3個(gè)C2結(jié)構(gòu)，基因染色體定位于1q23～24。識(shí)別CD64的代表性McAb有McAb22、McAb32.2、197和10.1等FcγRⅠ是高親合力受體，Kd值為10^-8～10^-9M，主要與人的單體IgG1、IgG3以及小鼠IgG2a和IgG3結(jié)合。與人IgG4結(jié)合的親合力明確降低，與IgG2則無結(jié)合能力。FcγRⅠ主要分布于單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等，但表達(dá)水平各不相同。FcγRⅠ位點(diǎn)數(shù)：15000～40000/每個(gè)單核細(xì)胞，>50000/巨噬細(xì)胞，<1000/新鮮中性粒細(xì)胞。IFN-γ可刺激單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞表達(dá)FcγRⅠ水平增加5～10倍，G-CSF也有這種促進(jìn)作用。

（2)FcγRⅡ（CD32)：40kDa穿膜糖蛋白，屬于Ig超家族成員，胞膜外區(qū)有2個(gè)C2結(jié)構(gòu)，基因染色體定位于1q23～24。識(shí)別CD32的代表性McAb有CIkM5、IV·3、KuFc79和41H16等。FcγRⅡ與單體人IgG1，IgG3、IgG4結(jié)合為低親合力，Kd5×10^-7M。FcγRⅡ表達(dá)于除紅細(xì)胞外的其它血細(xì)胞，分子數(shù)目：20000～40000/每個(gè)細(xì)胞。根據(jù)DNA序列和功能不同，F(xiàn)cγRⅡ可分為三種形式，不同形式FcγRⅡ的差別主要在于胞漿區(qū)的結(jié)構(gòu)不同。

（3)FcγRⅢ（CD16)：50～70kDa糖蛋白，屬Ig超家族成員，有2個(gè)C2結(jié)構(gòu)，基因染色體位于1q23～24。識(shí)別CD16代表性的McAb有HUNK2、Leu11、3G8、Gran1和B73.1等。FcγRⅢ結(jié)合人IgG、IgG3，為低親和力受體。FcγRⅢ有FcγRⅢA和FcγRⅢB兩種異型：①FcγRⅢA，穿膜結(jié)構(gòu)，主要分布于巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞，巨噬細(xì)胞表達(dá)高水平FcγRⅢA，而單核細(xì)胞表達(dá)水平較低。FcγRⅢA與二硫鍵連接的CD3ζ或FcεRⅠγ鏈雙體相關(guān)，巨噬細(xì)胞上FcγRⅢA與CD3復(fù)合體γ鏈相關(guān)，NK/LGL上FcγRⅢA則與ζ鏈相關(guān)。TGF-β促進(jìn)培養(yǎng)的單核細(xì)胞表達(dá)FcγRⅢA。②FcγRⅢB，通過GPI“錨”在中性粒細(xì)胞表面，每個(gè)人中性粒細(xì)胞表達(dá)10萬～20萬血液中可溶性的FcγRⅢ主要來自這種形式，中性粒細(xì)胞激活劑短時(shí)間處理后可明顯降低FcγRⅢB的表達(dá)水平，可能與通過激活內(nèi)源性蛋白酶切除GPI連接分子有關(guān)。

圖1-8 FcγR、FcαR和FcεR結(jié)構(gòu)示意圖

2.FcγR的功能　FcγR的功能主要是通過髓樣細(xì)胞和NK細(xì)胞來發(fā)揮的。

（1)單核-巨噬細(xì)胞：FcγRⅠ、Ⅱ和Ⅲ均可介導(dǎo)人單核細(xì)胞ADCC來殺傷腫瘤等靶細(xì)胞，這種ADCC效應(yīng)為Mg²⁺依賴，并需LFA-1等粘附分子參與。IFN-γ可促進(jìn)單核細(xì)胞FcγRⅠ介導(dǎo)的殺傷作用。單核-吞噬細(xì)胞可通過FcγRⅠ、Ⅱ、Ⅲ發(fā)揮調(diào)理吞噬和清除免疫復(fù)合物的作用。

（2)中性粒細(xì)胞：新鮮分離的中性粒細(xì)胞不能通過FcγR溶解靶細(xì)胞，但在IFN-γ刺激下可通過FcγRⅠ和FcγRⅡ介導(dǎo)殺傷作用，對(duì)于FcγRⅠ，IFN-γ主要是誘導(dǎo)其表達(dá)水平升高，而對(duì)FcγRⅡ表達(dá)水平并未見改變，可能是通過對(duì)殺傷機(jī)理的調(diào)節(jié)。GM-CSF也能通過FcγRⅡ明確增加中性粒細(xì)胞的殺傷水平。GPI連接的FcγRⅢB并不能介導(dǎo)中性粒細(xì)胞殺傷腫瘤的作用�；罨�中性粒細(xì)胞通過FcγRⅠ、Ⅱ發(fā)揮調(diào)理吞噬和清除免疫復(fù)合物的作用。

（3)嗜酸性粒細(xì)胞：未刺激的嗜酸性粒細(xì)胞沒有殺傷作用，GM-CSF、TNF和IL-5等是嗜酸性粒細(xì)胞發(fā)揮ADCC效應(yīng)的有效激活劑，在殺傷寄生蟲和抗腫瘤中有重要作用。GM-CSF對(duì)嗜酸性粒細(xì)胞的激活作用主要是通過FcγRⅡ介導(dǎo)的。

（4)NK細(xì)胞：通過FcγRⅢA介導(dǎo)ADCC殺傷腫瘤細(xì)胞等靶細(xì)胞，IL-2和IFN-γ可明顯提高NK細(xì)胞的殺傷活性，但并不明顯改變FcγRⅢA的表達(dá)水平。

（二)FcαR（CD89)

FcαR（CD89)為分子量60kDa穿膜糖蛋白，胞膜外區(qū)206氨基酸，穿膜區(qū)19氨基酸，胞漿區(qū)為41氨基酸，屬Ig超家族成員，胞膜外有2個(gè)C2結(jié)構(gòu)域，為中親和力受體，主要表達(dá)于單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等，介導(dǎo)吞噬、ADCC以及炎癥介質(zhì)的釋放。中性粒細(xì)胞表面FcαR可結(jié)合血清型和分泌型IgA1和IgA2，親和力約為Kd5×10^-7M。熱或化學(xué)物質(zhì)凝集的IgA可刺激中性粒細(xì)胞脫顆粒。

（三)FcεR（FcεRⅠ、FcεRⅡ)

1.FcεR的結(jié)構(gòu)和分布 FcεR可分為FcεRⅠ和FcεRⅡ兩類，其結(jié)構(gòu)、分布及介導(dǎo)的生物學(xué)作用有所不同。

（1)FcεRⅠ：為高親和力受體，Kd10^-9～10^-10M，由α、β、γ-γ四條鏈組成。其中α鏈含222個(gè)氨基酸殘基，分子量為25kDa，胞膜外區(qū)屬Ig超家族結(jié)構(gòu)，2個(gè)C2區(qū)，與FcγRⅡ和FcγRⅢ高度同源，胞膜外區(qū)與IgECε2/Cε3結(jié)合；穿膜區(qū)20左右氨基酸中含有與FcγRⅢA相同的8個(gè)氨基酸殘基；胞漿區(qū)的31個(gè)氨基酸結(jié)構(gòu)較為獨(dú)特。β鏈含243個(gè)氨基酸殘基，分子量為33kDa，有四個(gè)穿膜部分，N端與C端都位于胞漿內(nèi)，β鏈可能把α鏈和γ-γ鏈連在一起。兩條γ鏈由二硫鍵連接組成同源二聚體，每條鏈62個(gè)氨基酸，分子量為8kDa，胞膜外區(qū)只有5個(gè)氨基酸殘基，γ鏈與CD35高度同源，γ鏈與FcεRⅡ表達(dá)的穩(wěn)定性和信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)。NK細(xì)胞表面FcγRⅢA（CD16)可能與CD3ζ或FcεRⅠγ鏈相連，提示FcεRⅠγ鏈與CD3復(fù)合物中ζ的結(jié)構(gòu)和功能的相似性。FcεRⅠ主要分布于嗜堿性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞。

（2)FcεRⅡ（CD23)：低親和力受體，分子量45kDa，單鏈穿膜糖蛋白，Ⅱ型跨膜蛋白，屬C型植物血凝素家族成員。CD23含有321個(gè)氨基酸，N端在胞膜內(nèi)，1～23位氨基酸組成胞漿尾，24～43位氨基酸為疏水跨膜區(qū)，靠C端胞膜外區(qū)由277個(gè)氨基酸組成，有一個(gè)糖基化點(diǎn)，82、102、125、150位氨基酸殘基為蛋白水解酶敏感位點(diǎn)，凝集素同源區(qū)位于C端163Cys至282Cys之間，該同源區(qū)共含6個(gè)Cys。88至116位氨基酸之間有一個(gè)亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)，參與CD23分子同源二聚體的形成。CD23分子靠胞膜外C端裂解的不同片段14kDa、25kDa和33～37kDa片段均稱為IgE結(jié)合因子（IgE-binding factor IgE-BF)。FcεRⅡ可在蛋白水解酶裂解后形成可溶性CD23分子（sCD23)即IgE-BF。CD23mRNA有FcεRⅡamRNA和FcεRⅡbmRNA兩種，它們所翻譯的CD23分子僅在胞漿區(qū)有7個(gè)氨基酸殘基的差別（圖1-9)。FcεRⅡa僅B細(xì)胞表達(dá)，并易降解為sCD23；FcεRⅡb表達(dá)于B細(xì)胞、T細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、血小板、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、朗罕氏細(xì)胞、含有EBV基因組的鼻咽癌細(xì)胞、髓樣細(xì)胞系如U937等，主要以膜分子形式存在，IgECε3與FcεRⅡ結(jié)合有關(guān)。IL-4可誘導(dǎo)正常B細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞轉(zhuǎn)錄FcεRⅡbmRNA，促進(jìn)CD23的合成與表達(dá)，EBV核蛋白EBNA2對(duì)CD23表達(dá)及sCD23的釋放也有促進(jìn)作用。而IFN-γ、TGF-β、PGE2、糖皮質(zhì)激素等對(duì)B細(xì)胞表達(dá)CD23和釋放sCD23則起抑制作用。

2.FcεR的功能

（1)FcεRⅠ：嗜堿性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞具有高親和力FcεRⅠ，每個(gè)細(xì)胞表面約有10萬個(gè)，當(dāng)相應(yīng)變應(yīng)原與啫堿性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞表面IgE/FcεRⅠ復(fù)合物結(jié)合后通過交聯(lián)使磷酸肌醇水解，胞漿Ca²⁺濃度增加，使細(xì)胞脫顆粒，合成和釋放組織胺、LT、PAF等多種介質(zhì)，介導(dǎo)Ⅰ型速發(fā)型超敏反應(yīng)。

圖1-9 CD23分子結(jié)構(gòu)模式圖

（2)FcεRⅡ：FcεRⅡ?yàn)锽細(xì)胞發(fā)化激活抗原，變態(tài)反應(yīng)性疾病患者PBMC中CD23密度明顯增加，血清IgE-BP(sCD23)升高。sCD23具有B細(xì)胞生長因子（bcell growth. factor, BCGF)活性，故又稱B細(xì)胞來源的B細(xì)胞生長因子（B-BCGF)。sCD23的這種生長因子作用可能是作為配體與受體CD21（CR2)結(jié)合后介導(dǎo)的，CD23分子通過可結(jié)合碳水化合物的凝集素同源區(qū)與CD21糖鏈結(jié)合。此外，sCD23通過亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)，引起B(yǎng)細(xì)胞膜CD21分子交聯(lián)，促進(jìn)B細(xì)胞生長。sCD23對(duì)膜CD23有正反饋?zhàn)饔�，促進(jìn)B細(xì)胞的分化和IgE的產(chǎn)生，并與IL-4有協(xié)同作用，此外，F(xiàn)cεRⅡ還可介導(dǎo)IgE依賴的ADCC和吞噬作用。CD23與B淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化及惡變有關(guān)，EBV轉(zhuǎn)化B細(xì)胞后只有B細(xì)胞表達(dá)CD23才能建立永生化的細(xì)胞系，可能與EBV核蛋白的EBNA2有關(guān)，EBNA2結(jié)合于FcεRⅡa基因起始部位-275～-89的一個(gè)189bp DNA片段結(jié)合，反式作用于FcεRⅡa基因啟動(dòng)子，并誘導(dǎo)B細(xì)胞高表達(dá)CD23，sCD23引起膜CD21分子交聯(lián)，形成一種自分泌生長機(jī)制。慢性B淋巴細(xì)胞白血�。˙-CLL)患者B細(xì)胞表達(dá)CD23增加，患者血清中sCD23水平明顯升高。

關(guān)于IgM受體、IgD受體也有報(bào)道，前者主要表達(dá)于B細(xì)胞，后者表達(dá)于成熟B細(xì)胞。這兩種Ig Fc受體尚未歸入CD的編號(hào)，故在本節(jié)從略。此外與多聚IgA和IgM跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)至胞外分泌液中有關(guān)的多聚Ig受體（Poly-IgR),通過與多聚Ig中的J鏈結(jié)合而介導(dǎo)Ig轉(zhuǎn)運(yùn)功能，PolyIgR屬免疫球蛋白超家族成員。

（金伯泉)