1 試劑
1.1 標準抗蛇毒血清
由中國藥品生物制品檢定所分發(fā)。標準抗蛇毒血清應保存于2～8℃。
1.2 蛇毒
由檢定所分發(fā)。試驗用的蛇毒須以檢定所分發(fā)的標準抗蛇毒血清準確標定其試驗量（蝮蛇、眼鏡蛇及銀環(huán)蛇1個L+，五步蛇2個L+)。使用干毒時，須以精確的分析天平稱取，每次稱取量不得少于5mg，溶解后應在3天內（保存于2～8℃)用完。干毒應封m.payment-defi.com/yishi/存于裝有干燥劑的真空器皿中。亦可將干毒制成液體甘油蛇毒，即干毒溶解液與中性甘油（經116℃10分鐘滅菌)等量混合，每ml至少含50個試驗量，保存于2～8℃暗處。
1.3 稀釋液
硼酸鹽緩沖鹽水，滅菌后pH應為7.0～7.4。配方為：
氯化鈉8.5g
硼酸 4.5g
硼砂0.5g
加蒸餾水至1000ml，過濾。
2 用具
吸管、容量瓶、注射器應經標化。吸管、試管、容量瓶應潔凈干燥，其他用具應滅菌。
3 試驗動物
體重18～20g健康小白鼠。
4 試驗方法
4.1 稀釋標準抗蛇毒血清
用稀釋液稀釋標準抗蛇毒血清使每ml含抗銀環(huán)蛇、眼鏡蛇或抗蝮蛇毒血清5Um.payment-defi.com/zhuyuan/、或抗五步蛇毒血清10U，即與5個相應蛇毒試驗量混合后每0.4ml注射量中含1U或2U。
4.2 稀釋蛇毒
用稀釋液稀釋蛇毒，使其5個試驗量不超過0.8ml，在與抗蛇毒血清混合時補加稀釋液至2ml，即每0.4ml注射量中含1個試驗量。
4.3 稀釋待檢抗蛇毒血清
用稀釋液將待檢抭蛇毒清稀釋成數(shù)個稀釋度，使每ml抗蝮蛇、眼鏡蛇或銀環(huán)蛇毒血清約含5U或其上下：抗五步蛇毒血清約含10U或其上下。各稀釋度間隔5%～10%。
4.4 混合
4.4.1 待檢組
定量吸取不同稀釋度之待檢抗蛇毒血清各1ml，分別裝入小試管中，每管加入5個試驗量與待檢抗蛇毒血清相應的稀釋蛇毒液，補加稀釋液至2ml，混合均勻，加塞，置37℃結合45分鐘后立即注射小白鼠。
4.4.2 對照組
按下表定量吸取已稀釋之待檢抗蛇毒血清相應的標準抗蛇毒血清，分別裝入小試管中：
對照①
對照②
標準抗眼鏡蛇毒血清 1ml 1.2ml
每管加入5個試驗量之相應稀釋蛇毒液，補加稀釋液至2ml，混合均勻，加塞，置37℃結合45分鐘后立即注射小白鼠。
4.5 注射
每個稀釋度的待檢抗蛇毒血清、對照①及對照②各注射小白習4只，每只腹腔注射0.4ml。應注意勿使注射液流出。
4.6 觀察
試驗小白鼠每日觀察1次，并記錄發(fā)病及死亡情況，抗銀環(huán)蛇毒血清及抗五步蛇毒血清之試驗小白鼠觀察48小時，抗腹蛇毒血清及抗眼鏡蛇毒血清之試驗小白鼠觀察72小時。
4.7 結果判定
對照①小白鼠死亡50%以上，對照②小白鼠應比對照①死亡晚或不死亡。待檢抗蛇毒血清之效價應以與對照①小白鼠同時死亡之最高稀釋度判定。
