我們應(yīng)用常規(guī)微生物、病理技術(shù)及分子生物學(xué)方法在貓胃粘膜檢出了幽門螺桿菌(Hp)。18只家養(yǎng)貓均自市場購得,運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室的當(dāng)天宰殺,以排除實(shí)驗(yàn)室污染的可能性。殺死動(dòng)物后立即剖腹,取新鮮胃粘膜組織作快速尿素酶試驗(yàn)(UAT)、涂片染色、常規(guī)石蠟包埋組織切片Warthin-Starry銀染、細(xì)菌培養(yǎng)、寡核苷酸探針尼龍膜雜交及聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測。
18只貓中有15只UAT陽性,用Skirrow選擇性培養(yǎng)基在37°C、5%的微氧環(huán)境下培養(yǎng)出3株Hp樣細(xì)菌,培養(yǎng)基中加貓血或羊血比用人血生長好。有11只貓的胃粘膜及1株培養(yǎng)出的細(xì)菌的DNA被提取出來作雜交和擴(kuò)增。寡核苷酸探針長27bp,系螺桿菌屬細(xì)菌特異探針,經(jīng)3’-OH端加尾標(biāo)記半抗原地戈辛素后作膜雜交,11只貓胃粘膜有8只為陽性,貓胃培養(yǎng)菌也為陽性。PCR引物系幽站螺桿菌特異的16srRNA基因片段,擴(kuò)增片段長500bp,該引物不擴(kuò)增包括貓胃螺桿菌(H.felis)和空腸彎曲菌在內(nèi)的近緣菌株DNA,在11只貓的胃組織中發(fā)現(xiàn)7只陽性者,一株培養(yǎng)菌也為陽性。病理切片銀染則發(fā)現(xiàn)貓胃粘膜至少存在三種彎曲樣菌(既往稱之為幽門螺桿菌相關(guān)菌),一種為Hp樣菌,形態(tài)與Hp相近,一種為Gh(人胃螺旋菌)樣菌,菌體比Hpwww.med126.com粗大且長,螺旋數(shù)多,與Gh及H.felis相近,另一種呈彎曲樣m.payment-defi.com/rencai/菌,菌體較Hp長,形態(tài)與Hp相似,但螺旋不明顯。雙盲法觀察,發(fā)現(xiàn)有大量Hp樣菌的標(biāo)本,其對應(yīng)的DNA標(biāo)本PCR均為陽性,而有Hp樣或Gh樣細(xì)菌定殖的標(biāo)本,UAT及探針雜交均為陽性。
據(jù)此,我們認(rèn)為,貓胃粘膜有Hp定殖,貓應(yīng)該是Hp的動(dòng)物宿主和傳染源之一。由于貓是最常郵的寵物之一,因此明確其為Hp的動(dòng)物宿主對該菌的防治有重要的理論和實(shí)用價(jià)值,且為Hp的動(dòng)物傳播理論提供了直接證據(jù)。