2014《藥學(xué)專業(yè)知識一》藥物分析:薄層色譜法
推薦閱讀:2014《藥學(xué)專業(yè)知識一》藥物分析匯總
薄層色譜法(thin layer chromatography，TLC)系將供試品溶液點(diǎn)樣于涂布有固定相的薄層板上，經(jīng)展開、檢視后所得的色譜圖，與適宜的對照物按同法操作所得的色譜圖進(jìn)行比較，主要用于藥品的鑒別或雜質(zhì)檢查。
考點(diǎn)1：薄層色譜法的操作方法
制板——點(diǎn)樣——展開——定位——結(jié)果
制版：將固定相涂布在薄板上
常用固定相：硅膠、硅藻土、氧化鋁、微晶纖維素、聚酰胺
涂布方法：研磨——除氣泡——涂布——晾干——活化
活化方法：在ll0℃加熱30分鐘(目的：使硅膠吸附力增強(qiáng))
點(diǎn)樣：將樣品點(diǎn)在薄層板上
點(diǎn)樣要求：一般為圓點(diǎn)圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊2cm，樣點(diǎn)直徑為2～4mm，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜，一般為1.0～2.0cm醫(yī)學(xué)全在線m.payment-defi.com。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層板表面。
展開劑：可以是單一溶劑，可以用是不同試劑按一定比例組成的混合溶劑。浸入展開劑的深度為距薄層底邊0.5～1.0cm(切勿將樣品點(diǎn)浸入展開劑中)
定位：記錄展開劑前沿，及各斑點(diǎn)的位置
結(jié)果檢視：
光學(xué)法：有色斑點(diǎn)、熒光淬滅、發(fā)射熒光：254nm，365nm
化學(xué)法：顯色劑顯色
考點(diǎn)2：色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)
包括：檢測靈敏度、比移植、分離效能
1.檢測靈敏度
采用對照溶液稀釋若干倍的溶液與供試品溶液和對照溶液在規(guī)定的色譜條件下，在同一塊薄層板上點(diǎn)樣、展開、檢視，前者應(yīng)顯示清晰的斑點(diǎn)。
2.比移植
實(shí)踐中，Rf值的最佳范圍是0.3～0.5，可用范圍是0.2～0.8。
3.分離效能
分離效能以分離度表示，分離度(R)系指兩個(gè)相鄰斑點(diǎn)中心距離與兩斑點(diǎn)的平均寬度(直徑)的比值。
R = 2d/(W1+W2)
考點(diǎn)3：薄層色譜的應(yīng)用
1.定性分析：供試品、對照品點(diǎn)在同一薄層板上→展開顯色后→供試品醫(yī)學(xué)全在線m.payment-defi.com、對照品比移值一致→可認(rèn)為供試品與對照品是同一物質(zhì)。
2.純度檢查：
對照法：供試品、雜質(zhì)、對照品點(diǎn)在同一薄層板上→…→雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色與對照品斑點(diǎn)比較，不得更深→可認(rèn)為未超過規(guī)定的含雜質(zhì)最高限量。
