三、噬菌體與宿主關(guān)系 1、烈性噬菌體:凡能引起宿主細(xì)胞迅速裂解的噬菌體。敏感細(xì)菌。 2、溫和性噬菌體:噬菌體侵染宿主后,并不增殖,裂解,而與宿主DNA結(jié)合,隨宿主DNA復(fù)制而復(fù)制,此時(shí)細(xì)胞中找不到形態(tài)上可見的噬菌體,這種噬菌體稱為溫和性噬菌體。含有溫和性噬菌體的細(xì)菌稱為溶源性細(xì)菌lysogenic bacteria 溫和性噬菌體存在狀態(tài) 1)游離具感染性的virion; 2)前噬菌體(prophage):附著或整合在宿主染色體上,一道復(fù)制; 3)營(yíng)養(yǎng)期噬菌體:指導(dǎo)合成。 3、溶源性細(xì)菌特性 1)遺傳性 2)自發(fā)裂解 3)誘發(fā)裂解:雙氧水、UV、X、等。 4)免疫性 5)復(fù)愈(消失溶源性) 6)溶源轉(zhuǎn)變 溶源性菌株命名 四、噬菌體分離檢查與防治 (一)分離檢查(效價(jià)測(cè)定) 怎樣證實(shí)有噬菌體存在:宿主特異性;噬菌斑、液體培養(yǎng)變清等。 1、雙層平板法 2、單層平板法 3、玻片快速法 效價(jià)(titre),噬菌斑形成單位(pfu) (二)防治措施 1、消滅phage,杜絕其依賴生存條件。 2、選育和使用抗phage菌株。 3、菌種輪換使用。 4、藥物防治:加入某些金屬螯合劑、表面活性劑。 五、亞病毒 1、類病毒viroid:沒有衣殼包裹的RNA分子。 2、擬病毒virusoids(類類病毒):一類包括在植物病毒粒子中的類病毒,RNA。 3、朊病毒prion, virino:一類能侵染動(dòng)物并在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的小分子無(wú)免疫性的疏水性蛋白。 艾滋病 AIDS 獲得性免疫缺陷綜合征 1981年首先在USA發(fā)現(xiàn),1983年巴斯德研究所宣布分離出一種virus證實(shí)為AIDS的病原,1986年WHO定名為人類免疫缺陷病毒(HIV)。 HIV專門侵犯淋巴細(xì)胞,造成免疫缺陷。 傳播途徑:血液、母嬰、體液 第二章:微生物營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基 了解不同微生物需要什么營(yíng)養(yǎng)物,怎樣吸收,起什么作用,如何為其配餐。 營(yíng)養(yǎng)物:必須得到的細(xì)胞結(jié)構(gòu) 成分,必須得到的能量?jī)?chǔ)存物質(zhì)。 營(yíng)養(yǎng):把營(yíng)養(yǎng)物從外界吸收至細(xì)胞內(nèi),復(fù)制出新細(xì)胞結(jié)構(gòu)的過(guò)程。 1節(jié):營(yíng)養(yǎng)物及其功能 一、細(xì)胞化學(xué)組成 整個(gè)生物界大體相同,主要是C、H、O、N(占干重90-97%),C(約50%),此外為各種無(wú)機(jī)元素,由這些元素再組成化合物。其中C/N一般是5:1。 1、水分和無(wú)機(jī)元素 含水70-90%(鮮重),無(wú)機(jī)元素(3-10%干重)依次為P、S、K、Mg、 Ca、Fe、Zn、Mn等。 2、有機(jī)物 蛋白質(zhì),核酸,碳水化合物,類脂,維生素等 二、主要營(yíng)養(yǎng)物及其功能 主要功能:提供合成原生質(zhì)和代謝產(chǎn)物原料;產(chǎn)生合成反應(yīng)及生命活動(dòng)所需能量;調(diào)節(jié)新陳代謝。 (一)碳源物質(zhì) 定義:凡能提供微生物營(yíng)養(yǎng)所需碳元素的營(yíng)養(yǎng)源。 功能:碳源、能源 微生物碳源譜: (二)氮源物質(zhì) 定義:凡能提供微生物營(yíng)養(yǎng)所需氮元素的營(yíng)養(yǎng)源。 功能:氮源,一般不作能源。 微生物氮源譜: m.payment-defi.com 氨基酸自養(yǎng)型和異養(yǎng)型生物 速效氮源和遲效氮源 生理堿性、酸性、中性鹽 (三)能源 化學(xué)能:有機(jī)物-化能異養(yǎng)微生物 無(wú)機(jī)物 -化能自養(yǎng)微生物 光能 (四)生長(zhǎng)因子 定義:一類對(duì)微生物正常代謝必不可少且又不能從簡(jiǎn)單的碳、氮源自行合成的所需極微量的有機(jī)物。 種類:維生素、AA、base、FA等。 作用:輔酶或酶活化 來(lái)源:酵母膏、玉米漿、麥芽汁等,復(fù)合維生素。 濃度: (五)無(wú)機(jī)鹽 所需濃度在10-3-10-4M的元素為大量元素 所需濃度在10-6-10-8M為微量元素。 主要功能:構(gòu)成菌體成分;酶活性基組成或維持酶活性;調(diào)節(jié)滲透壓、pH、Eh;化能自養(yǎng)微生物能源等。 無(wú)機(jī)元素來(lái)源與功能: 一些無(wú)機(jī)元素加入鹽: (六)水 存在狀態(tài):游離態(tài)(溶媒)和結(jié)合態(tài)(結(jié)構(gòu)組成) 生理作用:組成成分;反應(yīng)介質(zhì);物質(zhì)運(yùn)輸媒體;熱的良導(dǎo)體。 2節(jié):微生物營(yíng)養(yǎng)類型 依碳源不同: 異養(yǎng)型heterotrophs(不能以CO2為主要或唯一碳源。 自養(yǎng)型autotrophs(能以CO2為主要或唯一碳源。 依能源不同: 光能營(yíng)養(yǎng)型phototrophs(光反應(yīng)產(chǎn)能) 化能營(yíng)養(yǎng)型chemotrophs (物質(zhì)氧化產(chǎn)能) 這樣可將微生物分成四種營(yíng)養(yǎng)類型 (插入) 其中,化能異養(yǎng)型又據(jù)利用有機(jī)物特性,分成腐生和寄生。 營(yíng)養(yǎng)類型劃分不是絕對(duì)的,不同生活條件下,可相互轉(zhuǎn)變。 3節(jié):營(yíng)養(yǎng)物吸收與代謝物分泌 營(yíng)養(yǎng)物吸收至胞內(nèi)被利用,代謝物分泌到胞外以免積累,這就是物質(zhì)運(yùn)輸過(guò)程。 通透性與吸收是不同概念。 一般 大分子:先水解為小分子,再吸收。 脂溶性物質(zhì):易透過(guò) 離子化合物:弱快強(qiáng)慢(極性) 一、營(yíng)養(yǎng)物吸收 1、單純擴(kuò)散 simple diffusion 依靠胞內(nèi)外溶液濃度差,順濃度梯度運(yùn)輸,不消耗代謝能,無(wú)特異性。水、二氧化碳、氧氣、甘油、乙醇等。 2、促進(jìn)擴(kuò)散 facilitated diffusion 借助載體蛋白順濃度梯度運(yùn)輸,不耗能,有特異性。載體蛋白(滲透酶)有底物特異性,是誘導(dǎo)產(chǎn)生的。硫酸根、磷酸根、糖(真核) 3、主動(dòng)運(yùn)輸 active transport 吸收營(yíng)養(yǎng)物的主要機(jī)制。 逆濃度梯度運(yùn)輸,耗能,需載體蛋白,有特異性。氨基酸、乳糖等糖類、鈉、鈣等無(wú)機(jī)離子。 親和力改變←蛋白構(gòu)象改變→耗能 上述3種方式中,被運(yùn)輸?shù)娜苜|(zhì)分子都不發(fā)生改變。 4、基團(tuán)轉(zhuǎn)位 group translocation 屬主動(dòng)運(yùn)輸,但溶質(zhì)分子發(fā)生化學(xué)修飾-定向磷酸化。主要依賴磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)和磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)(PTS)。 PEP+ HPr<=>丙酮酸+P-HPr (EI) 糖+P-HPr<=>糖-P+HPr (EII) 膜對(duì)大多數(shù)磷酸化合物具有高度的不滲透性。葡萄糖、果糖、甘露糖、嘌呤、核苷、脂肪酸等。 二、代謝物分泌 微生物能分泌多種物質(zhì),如有機(jī)酸、糖類、胞外酶、莢膜多糖等,由此可知,分泌與吸收不是同一機(jī)制。 4節(jié):培養(yǎng)基 medium 選用各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),經(jīng)人工配制用來(lái)培養(yǎng)微生物的基質(zhì)。 一、培養(yǎng)基類型 1、依來(lái)源不同:合成、天然、半合成。 2、依狀態(tài)不同:固體、半固體、液體。 3、依功能不同:選擇、鑒別 二、選擇和配制培養(yǎng)基的原則和方法 (一)四個(gè)原則 1、目的明確 培養(yǎng)什么微生物,獲得什么產(chǎn)物,用途 2、營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào) 恰當(dāng)配比,尤其是C/N比(100/0.5-2) 3、物理化學(xué)條件適宜 pH,考慮區(qū)別,培養(yǎng)基調(diào)節(jié)能力。采用磷酸緩沖液或假如碳酸鈣,流加酸堿。 滲透壓和水活度 aw : 等滲適宜。 aw表示在天然環(huán)境中,微生物可實(shí)際利用的自由水或游離水含量。微生物適宜生長(zhǎng)的aw為0.6-0.998之間。氧化還原電位Eh:好氧微生物+0.1v以上;兼性厭氧+0.1v以上行好氧呼吸, +0.1v以下行發(fā)酵;厭氧微生物+0.1v以下生長(zhǎng)。 4、經(jīng)濟(jì)節(jié)約 以粗代精、以廢代好、以簡(jiǎn)代繁等。
(二)四種方法 1、生態(tài)模擬 2、查閱文獻(xiàn) 3、精心設(shè)計(jì) 4、實(shí)驗(yàn)比較 第三章:微生物代謝 廣義的代謝--生命體進(jìn)行的一切化學(xué)反應(yīng)。 代謝分為能量代謝和物質(zhì)代謝,分解代謝和合成代謝。 分解代謝:復(fù)雜營(yíng)養(yǎng)物分解為簡(jiǎn)單化合物(異化作用)。 合成代謝:簡(jiǎn)單小分子合成為復(fù)雜大分子(同化作用) 二者關(guān)系 初級(jí)和次級(jí)代謝 依據(jù)代謝產(chǎn)物在微生物中作用不同,又有初級(jí)代謝和次級(jí)代謝。 初級(jí)代謝:能使?fàn)I養(yǎng)物轉(zhuǎn)化為結(jié)構(gòu)物質(zhì)、具生理活性物質(zhì)或提供生長(zhǎng)能量的一類代謝。產(chǎn)物有小分子前體物、單體、多聚體等生命必需物質(zhì)。 次級(jí)代謝:某些微生物中并在一定生長(zhǎng)時(shí)期出現(xiàn)的一類代謝。產(chǎn)物有抗生素、酶抑制劑、毒素、甾體化合物等,與生命活動(dòng)無(wú)關(guān),不參與細(xì)胞結(jié)構(gòu),也不是酶活性必需,但對(duì)人類有用。 二者關(guān)系:先初后次,初級(jí)形成期也是生長(zhǎng)期,只有大量生長(zhǎng),才能積累產(chǎn)物。 1節(jié):微生物能量代謝 微生物對(duì)能量利用: 有機(jī)物 化能異養(yǎng)菌 日光 光能營(yíng)養(yǎng)菌 通用能源 還原態(tài)無(wú)機(jī)物 化能自養(yǎng)菌 ATP 只有ATP和酰基輔酶A起偶聯(lián)作用,其他高能化合物只作為〜P供體。 生物氧化過(guò)程分為:脫氫、遞氫、受氫三個(gè)階段。 生物氧化功能:產(chǎn)能(ATP)、產(chǎn)還原力[H]、產(chǎn)小分子中間代謝物。 以下主要講述化能異養(yǎng)微生物的生物氧化和產(chǎn)能。
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