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             葉酸片-葉酸-高效液相色譜法
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葉酸片-葉酸-高效液相色譜法

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫中心 藥學論壇 葉酸片-葉酸-高效液相色譜法
方法名稱:
葉酸片-葉酸-高效液相色譜法
應用范圍:

本方法采用高效液相色譜法測定葉酸片中葉酸的含量。

本方法適用于葉酸片。

方法原理:
供試品研細,經氨溶液溶解后,用水定量稀釋,進入高效液相色譜儀進行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長254nm處檢測葉酸的峰面積,計算出其含量。
試劑:

1 .甲醇

2. 磷酸二氫鉀

3. 0.1mol/L氫氧化鉀溶液

4. 0.5%氨溶液

儀器設備:

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相:以磷酸二氫鉀6.8g與0.1mol/L氫氧化鉀溶液70mL,加水稀釋至850mL,并調節(jié)pH值至6.3±0.1,加甲醇80mL,用水稀釋成1000mL的溶液

2.2 檢測波長:254nm

2.3 柱溫:室溫

試樣制備:

1. 對照品溶液的制備

精密稱取葉酸對照品約5mg,置25mL量瓶中,加0.5%氨溶液約15mL溶解后,用水稀釋至刻度,搖勻,即為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取本品50片(0.4mg規(guī)格)或20片(5mg規(guī)格),精密稱定,研細,精密稱取適量(約相當于葉酸5mg),置25mL量瓶中,加0.5%氨溶液約15mL,置熱水浴中加熱20分鐘,時時振搖使葉酸溶解,放冷,用水稀釋至刻度,搖勻,濾過,續(xù)濾液即為供試品溶液。

注:“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一!熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟:
分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL,注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器于波長254nm處測定葉酸(C19H19N7O6)的峰面積,計算出其含量。
參考文獻:

中華人民共和國藥典,國家藥典委員會編,化學工業(yè)出版社,2005版,一部,p.109。

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