方法名稱:
維生素K1的測定—高效液相色譜法
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方法名稱: |
維生素K1的測定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍: |
本方法采用高效液相色譜法測定維生素K1的含量。 本方法適用維生素K1。 |
方法原理: |
供試品和內(nèi)標(biāo)均制成流動(dòng)相溶液,進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長254nm處檢測維生素K1(C31H46O2)和內(nèi)標(biāo)鄰苯二甲酸二甲酯的吸收值,計(jì)算出其含量。 |
試劑: |
1.石油醚 2. 正己烷 |
儀器設(shè)備: |
1. 儀器 硅膠為填充劑,維生素K1的順、反式異構(gòu)體之間及順式異構(gòu)體峰與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。 2. 色譜條件 |
試樣制備: |
1. 稱取供試品 取本品20mg,精密稱定,置50mL量瓶中。 2. 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取維生素K1對(duì)照品適量,與供試品同法配制。 3. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備 取苯甲酸膽甾酯37.5mg,置25mL量瓶中,加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度,即得。 4. 供試品溶液的制備 上述供試品加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取上述溶液5mL與內(nèi)標(biāo)溶液各1mL,置10mL量瓶中,以流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,即得供試品溶液。 注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟: |
分別精密吸取上述供試品溶液與對(duì)照品溶液,10μL 注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器,于波長254nm處測定維生素K1和內(nèi)標(biāo)苯甲酸膽甾酯的吸收值,按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算,即得。 |
參考文獻(xiàn): |
中華人民共和國藥典,國家藥典委員會(huì)編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005年版,二部,p676。 |