方法名稱:
枳實導(dǎo)滯丸-橙皮苷的測定-薄層掃…" />
方法名稱: |
枳實導(dǎo)滯丸-橙皮苷的測定-薄層掃描法 |
應(yīng)用范圍: |
本方法采用薄層掃描法測定枳實導(dǎo)赤丸中橙皮苷的含量。 本方法適用于枳實導(dǎo)滯丸中橙皮苷含量的測定。 |
方法原理: |
供試品于索氏提取器中經(jīng)甲醇加熱回流,過濾,濾液蒸干,殘渣用甲醇溶解,制成供試液,點樣、展開,以1%三氯化鋁的甲醇溶液顯色,用薄層掃描儀進行熒光掃描。于激發(fā)波長λ=300 nm測量橙皮苷(C28H34O15)熒光強度的積分值,計算其含量。 |
試劑: |
1. 甲醇 2. 1%三氯化鋁的甲醇溶液 |
儀器設(shè)備: |
1 儀器 1.1索氏提取器 1.2薄層掃描儀 1.3點樣器 一般采用微升毛細管或與之相應(yīng)的點樣器材。 1.4展開室 可用適合薄層板大小的專用玻璃缸,底部平底或雙槽,蓋子須密閉。 2 材料 2.1聚酰胺薄膜 |
試樣制備: |
1. 對照品溶液的制備 精密稱取橙皮苷對照品適量,加甲醇制成每1mL含0.05mg的溶液,作為對照品溶液。 2. 供試品溶液的制備 精密稱取供試品粉末(過三號篩)約 0.5g,置索氏提取器中,加甲醇 90mL,加熱回流4小時,趁熱濾過至100mL量瓶中,用少量甲醇洗滌容器,洗液與濾液合并,放冷,加甲醇至刻度,搖勻,精密量取 5mL,置 25mL量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,作為供試品溶液。 注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所稱取重量的千分之一!熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟: |
1. 薄層板制備 用商品預(yù)制板-聚酰胺薄膜。 2. 點樣 精密吸取供試品溶液5μL、對照品溶液2μL與5μL,分別點于同一聚酰胺薄膜上,如用點樣器點樣到薄層板上,一般為圓點,點樣基線距底邊1.0~1.5cm,樣點直徑一般不大于2mm,點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。 3. 展開 將點好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中,以甲醇為展開劑,展開,展距約3cm,取出,晾干,噴以1%三氯化鋁的甲醇溶液,放置3小時。 4. 含量測定 在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板,周圍用膠布固定,選擇反射方式,進行熒光掃描,激發(fā)波長:λ=300 nm, 測量供試品熒光強度的積分值與對照品熒光強度的積分值,計算。 用外標法測定時,若對照品各數(shù)據(jù)點在校正曲線上呈一通過原點的直線時,可用一點法校正,如不通過原點通常宜采用二點法校正,必要時用多點法校正。 |
參考文獻: |
中華人民共和國藥典,國家藥典委員會編、化學(xué)工業(yè)出版社,2005年版,一部p. 515。 |