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從紅豆杉植物細胞培養(yǎng)液絮凝物中分離純化紫杉醇的方法

公開(公告)號 CN1181066C  
公開(公告)日 2004.12.22  
申請(專利)號 CN02152157.3  
申請日期 2002.12.03  
專利名稱 紅豆杉植物細胞培養(yǎng)液絮凝物中分離純化紫杉醇的方法  
主分類號 C07D305/14  
分類號 C07D305/14  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 梅縣梅雁生物工程研究所  
發(fā)明(設(shè)計)人 王國亮;駱雪蘭;謝維權(quán);黃巧明  
地址 514787 廣東省梅州市梅縣嘉應(yīng)西路梅雁工業(yè)大樓三樓  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu)  
代理人  
國省代碼 廣東;44  
主權(quán)項 一種從紅豆杉植物細胞培養(yǎng)液絮凝物中分離純化紫杉醇的方法,其特征在于:(1)紫杉醇的紅豆杉植物細胞培養(yǎng)液絮凝物用90~99%乙醇或甲醇室溫浸提4~5次,每次浸提20~24小時,定時攪拌,減壓抽濾,濾液合并減壓回收乙醇或甲醇得流浸膏;(2)乙醇或甲醇提取得到的流浸膏直接進行硅膠柱層析,用正己烷洗脫除脂溶性雜質(zhì),用含5%~30%丙酮的正己烷梯度洗脫;(3)常壓硅膠柱層析所得紫杉醇粗品,用薄層層析硅膠H10~40μm裝的填低壓柱層析,含3%-5%丙酮的二氯甲烷梯度洗脫紫杉醇;(4)低壓柱層析所得紫杉醇用乙酸乙酯和正己烷混合溶劑體積比為1.6∶1進行重結(jié)晶。  
摘要 本發(fā)明公開了一種從紅豆杉植物細胞培養(yǎng)液絮凝物中分離純化紫杉醇的方法。首先用90~99%乙醇或甲醇多次室溫浸提絮凝物,乙醇或甲醇的提取物或?qū)⑵溥M一步用二氯甲烷萃取所得產(chǎn)物,先后進行常壓硅膠柱層析和薄層硅膠低壓柱層析,柱層析所得紫杉醇用乙酸乙酯和正己烷或丙酮和正己烷混合溶劑多次重結(jié)晶,紫杉醇純度達98.1%。由于紅豆杉植物細胞培養(yǎng)液絮凝物體積相對細胞培養(yǎng)液體積小得多,卻富集了細胞培養(yǎng)液中95~100%的紫杉醇,所以,從絮凝物中提取紫杉醇要比從細胞培養(yǎng)液中直接提取紫杉醇節(jié)省了大量有機溶劑、簡化了分離過程、降低了成本、節(jié)省了提取紫杉醇的時間。  
國際公布  
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