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金銀花提取物-綠原酸類成分-HPLC

  
方法名稱:
  花提取物-綠原酸類成分-HPLC
應(yīng)用范圍:
  本方法適用于金銀花提取物中綠原酸、3,5-二咖啡;奎寧酸的含量測定
方法原理:
 本品加水煎煮提取,經(jīng)液相色譜分離,在327 nm處測定峰面積,外標(biāo)法計(jì)算含量
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件:
 

儀器    Agilent-1100高效液相色譜儀,四元泵,自動進(jìn)樣器,柱溫箱,DAD二極管陣列檢測器,AgilentAl0. 02工作站

   色譜條件    色譜柱:Kromasil C18(4. 6 mm ×250 mm,5 μm);流動相:A為乙腈,B 為0. 3 磷酸溶液,A:0→20 min 5 →10,20→45 min 10 →26;流速:1 mL/min;檢測波長:327 nm;柱溫:30 ℃
試樣制備:
 

對照品溶液制備    分別精密稱取綠原酸和3,5-二咖啡;鼘幩徇m量,加50 甲醇制成每1 mL含綠原酸0. 408 mg、3,5-二咖啡?鼘幩0. 278 mg的混合溶液。精密吸取6 mL10 mL量瓶中,加50 甲醇至刻度,搖勻,即得。

    供試品溶液制備    取金銀花藥材200 g,3份,分別照文獻(xiàn)所收載的石-硫法和改良石-硫法進(jìn)行提。▋纱渭逯笥盟烤謩e為20倍和12倍) 、處理,得濃縮液,繼續(xù)減壓濃縮得稠膏,真空干燥,粉碎成細(xì)粉,分別得3種金銀花提取物A、B、C。取提取物A、B細(xì)粉各75 mg、提取物C細(xì)粉25 mg,精密稱定,分別置10 mL量瓶中,加50 甲醇至刻度,振搖使完全溶解(B有少量不溶物),0. 45 μm微孔濾膜濾過,取續(xù)濾液,即得。
操作步驟:
  分別精密吸取綠原酸和3,5-二咖啡酰基奎寧酸混合對照液以及金銀花供試品溶液各10 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算綠原酸和3,5-二咖啡;鼘幩岷俊
附件:
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備注:
 
參考文獻(xiàn):
  陳有根等. 3種經(jīng)典工藝生產(chǎn)的金銀花提取物中綠原酸類成分含量比較. 中成藥.2007,29(3):362~364
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