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苦丁茶—熊果酸的含量測定方法—RP-HPLC

  
方法名稱:
  苦丁茶—熊果酸的含量測定—RP-HPLC
應用范圍:
  本方法適用于苦丁茶中的熊果酸含量的測定
方法原理:
 本品粗粉加95 %乙醇回流提取,經(jīng)液相色譜分離,在220 nm處測定峰面積,外標法計算含量
儀器設備及實驗條件:
 

儀器   BT8100 高效液相色譜儀(美國Bi0tr0nic公司),BT8200 紫外可見檢測儀(美國Bi0tr0nic公司),C2R6A chr0mat0pac 自動積分儀(美國Bi0tr0nic公司)

色譜條件   色譜柱:Hypersil C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,10 μm) ;動相:甲醇-水-磷酸二氫鈉-乙二胺(90∶10∶0.20∶0.02) ;檢測波長:220 nm;流速:0.6 mL/min;柱溫:25 ℃

試樣制備:
 

對照品溶液制備  取熊果酸標準品配制成濃度為0.2680 mg/mL熊果酸對照品溶液。

供試品溶液制備  稱取1.000 g苦丁茶粗粉,加入14 mL體積分數(shù)為90 %乙醇-水溶液,在85 ℃水浴上回流提取2次,每次2 h,過濾除去濾渣,合并2次提取液。用20 %Na0H調(diào)節(jié)提取液的pH=9~11,除去大分子雜質(zhì),所得濾液用10 % H2S04酸化至pH=1~2,過濾所得沉淀,水洗至中性,干燥,得到熊果酸富集物。用甲醇溶解并定容至10 mL,作為供試品溶液。

操作步驟:
  分別精密吸取熊果酸對照液以及苦丁茶供試品溶液各6 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標法計算熊果酸含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:m.payment-defi.com)
備注:
 
參考文獻:
  任秀,周春山,魏琦峰等. 反相高效液相色譜法測定苦丁茶中的熊果酸. 光譜實驗室. 2004,21(4):693~697
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