| 公開(公告)號 | CN1240719C |
| 公開(公告)日 | 2006.02.08 |
| 申請(專利)號 | CN01105798.X |
| 申請日期 | 2001.03.28 |
| 專利名稱 | 一種新型雙功能水蛭素及其制備方法和應(yīng)用 |
| 主分類號 | C07K14/815(2006.01)I |
| 分類號 | C07K14/815(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;A61P7/02(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 復(fù)旦大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 宋后燕;湯其群;管瀚俊;莫 煒;顧銀良 |
| 地址 | 200032上海市醫(yī)學(xué)院路138號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 上海正旦專利代理有限公司 |
| 代理人 | 吳桂琴 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項 | 一種新型重組雙功能水蛭素，其特征在于將野生型水蛭素HV-1肽鏈的32-35位Ser32-Asp33-Gly34-Glu35替換為Arg32-Gly33-Asp34-Ser35，Asp53-Gly54-Asp55-Phe56-Glu57-Glu58-Ile59-Pro60-Glu61-Glu62-Tyr63-Leu64-Gln65替換為Gln53-Gly54-Asp55-Phe56-Glu57-Pro58-Ile59-Pro60-Glu61-Asp62-Ala63-Tyr64-Asp65-Glu66。 |
| 摘要 | 本發(fā)明屬生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種兼具抗凝血酶活性和抗血小板聚集活性的雙功能水蛭素(Bifunctional RecombinantHirudin)的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和制備方法及其應(yīng)用。根據(jù)對野生型水蛭素的結(jié)構(gòu)及其生化特性的分析，設(shè)計了新型雙功能水蛭素分子結(jié)構(gòu)。化學(xué)合成突變體基因，然后與真核表達(dá)載體pPIC9K重組，轉(zhuǎn)化甲醇營養(yǎng)型酵母GS115，篩選高表達(dá)工程菌。工程菌經(jīng)發(fā)酵擴增，離心收集上清液，經(jīng)三步法純化雙功能水蛭素。所得產(chǎn)品凍干后，具有抗凝血酶活性并能顯著抑制ADP誘導(dǎo)的血小板聚集，對于預(yù)防血栓性疾病的發(fā)生有明顯的作用。 |
| 國際公布 |
