臨床生物化學:第四節(jié)　神經、精神疾病生化診斷

神經性或精神性疾病的診斷，根據其致病原因可采用各種不同的檢查方法，其中有的實驗室生化檢查對某些神經或精神性疾病的診斷可提供非常有價值的依據，但大多只是作為一種輔助檢查，提供診斷的信息。測定的標本常采用CSF，因血、尿或其它體液中的物質含量不能確切地反映腦內情況。檢測的內容多為蛋白質、酶和神經遞質及其代謝產物。近10多年來，由于神經分子學的發(fā)展，用分子生物學技術對神經性或精神性疾病進行基因診斷已有資料報道。

一、蛋白質檢查

（一)總蛋白質

CSF是存在于腦室及蛛網膜下隙內的一種無色透明液體。正常CSF中的蛋白質80％以上通過超濾作用來自于血漿，但不同部位的CSF標本，其蛋白質有差異。正常m.payment-defi.com/hushi/不同部位CSF蛋白質總量為：腦室液50-150mg/L；腦池液150-250mg/L；腰池液150-450mg/L。CSF蛋白質總量隨年齡增長而增高，兒童為100-200mg/L，20-50歲約為150-450mg/L，老年人可達600mg/L。足月新生兒生后6天為300-2000mg/L，6-30天為300-1500mg/L，1-6個月為300-1000mg/L，早產新生兒4000mg/L。但正常成人超過450mg/L，一般是病理性的增高，可見于感染、出血、占位性病變及蛛網膜粘連等。多次電休克治療后可見CSF總蛋白質增高。

CSF蛋白電泳呈現前清蛋白含量異常增高時，多見于腦積水、腦外傷、腦萎縮及中樞神經系統退行性變等疾病。含量下降見于腦內炎性疾病。CSF免疫電泳可提示血腦屏障滲透性改變的嚴重程度，如β-脂蛋白升高，證明滲透性明顯增加；α₁-巨球蛋白升高，提示滲透性中等增加；IgA升高表示滲透性輕度增加：γ-球蛋白增高，常見于脫髓鞘性疾病（多發(fā)性硬化及麻痹性癡呆)。

（二)蛋白指數

⒈白蛋白指數　CSF中的白蛋白完全通過血腦屏障來自于血漿。其白蛋白指數計算公式為：

當指數＜9時，認為血腦屏障無損害；若指數為9-14，有輕度損害；指數為15-30，中度損害；指數為31-100，嚴重損害；指數＞100，表明屏障完全崩潰。

⒉IgG和白蛋白比率　在脫髓鞘疾病時，由于鞘內合成免疫球蛋白增加，CSF中免疫球蛋白亦增加，測定CSF中IgG和白蛋白比率對脫髓鞘疾病診斷有一定價值。

比率=CSF中IgGmg/dL/CSF中白蛋白mg/dL

70％多發(fā)性硬化病例比率＞0.27。

⒊免疫球蛋白指數　CSF免疫球蛋白指數計算公式：

指數參考范圍：0.30-0.77，指數＞0.77，證明鞘內IgG合成增加，90％以上多發(fā)性硬化病例指數＞0.77。

（三)特異性蛋白質

⒈β-淀粉樣蛋白（β-Amyloid Protein)AD患者腦脊液中存在β-淀粉樣蛋白，測定該蛋白質對AD的診斷有重要價值。顱腦外傷亦可出現β-淀粉樣蛋白。

⒉APP（β-淀粉樣蛋白前體，β-AmyloidPrecursor Protein)AD患者腦脊液、血漿及血小板中均存在APP，為β-淀粉樣蛋白的前體物質。

⒊C反應蛋白　正常人腦脊液中無C反應蛋白，當中樞神經系統急性感染時，患者血清和CSF中C反應蛋白升高。

⒋β₂-微球蛋白（β₂-M)正常成人CSF中β₂-M含量為11.5±37mg/L，當顱內感染，癲癇、腫瘤、腦梗塞、格林-巴利綜合征等疾病時可見β₂-M含量升高。

⒌免疫球蛋白　CSF中IgG、IgA及IgM的檢測對某些神經系統疾病的診斷或鑒別診斷有意義，如結核性腦膜炎，IgA增高顯著；化膿性腦膜炎，IgM顯著增高；病毒性腦膜炎時IgA及IgM無明顯改變。

⒍神經組織特異蛋白 測定神經組織特異蛋白首先需分離、純化及鑒定，再制備成多克隆或單克隆抗體，用雙部位放免法進行測定。①神經膠質纖維酸性蛋白（GFAP)增加，可見于Alzheimer型癡呆、脊髓空洞癥、神經膠質瘤、腦星形細胞病、血管性疾病及海綿狀腦病。②髓鞘堿性蛋白（MBP)增加，見于多發(fā)性硬化、髓鞘損傷性疾病。

二、酶活力測定

CSF中酶活力測定可反映中樞神經系統的病變，因CSF中酶濃度一般不受中樞神經系統之外疾病的影響。

⒈LDH及同工酶增高見于癲癇、腦腫瘤、癡呆、腦膜炎、腦積水、肌萎縮側束硬化、腦血管性疾病及腦外傷等。

⒉GOT增高見于癡呆、癲癇、腦外傷、小腦病變、腦腫瘤、周圍神經病及多發(fā)性硬化。

⒊CPK（CK)同工酶增高見于早期假肥大型肌營養(yǎng)不良癥、腦腫瘤、癲癇、腦膜炎、腦損傷及腦血管性疾病等。

⒋酸性磷酸酶增高可見于腦萎縮、腦腫瘤、腦膜炎及多發(fā)性硬化等。

⒌核糖核酸酶（RNase)增高見于癲癇、腦腫瘤、癡呆、脫髓鞘性疾病及腦膜炎等。

⒍多巴胺-β-羥化酶（DβH)精神分裂癥患者血中DβH活性增高，而老年性癡呆患者CSF中DβH活性降低。

⒎蛋白酶及鳥嘌呤酶增高見于多發(fā)性硬化。

⒏乙酰膽堿酯酶（AchE)及假膽堿酯酶（BchE)Alzheimer病患者腦脊液中AchE活性降低，但血漿及腦脊液中BchE活性增高。癲癇患者血清AchE顯著增高。

⒐β-葡萄糖苷酶增高見于脫髓鞘性疾病、糖尿病性神經病、癲癇、腦腫瘤及細菌性腦膜炎等。

三、神經遞質的檢查

神經遞質對中樞神經系統功能及人的精神活動起著重要的作用，某些神經系統的疾病及精神病可表現出神經遞質代謝的變化，臨床上檢測神經遞質及其代謝物對其診斷具有一定的意義。

⒈Ach　癲癇發(fā)作時患者血液及腦脊液中Ach含量顯著增高，急性顱腦損傷，腦脊液中Ach含量升高。

⒉DA及HVA　帕金森病（Parm.payment-defi.com/job/kinsondisease，PD)患者CSF中DA的代謝產物HVA含量降低；癲癇病人CSF中DA及HVA顯著降低；精神分裂癥病人血漿中HVA升高。

⒊5-HT及5-HIAA　精神分裂癥病人血中5-HT含量減少，抑郁性精神病患者CSF中5-HIAA含量降低；PD及癲癇患者CSF中5-HT及5-HIAA降低；精神發(fā)育遲滯的病兒血中5-HT含量減少，CSF及尿中5-HIAA含量亦降低；顱腦外傷及腦血管疾病患者CSF中5-HIAA含量上升。

⒋GABA　癲癇病人CSF中GABA含量明顯下降。

⒌谷氨酸　PA病人CSF中谷氨酸含量減少。

⒍神經肽

⑴內啡肽：躁狂癥患者CSF中β-內啡肽含量升高，癥狀緩解時下降；精神分裂患者CSF中β-內啡肽含量明顯升高，急性精神分裂癥時其含量超過正常的10倍。而AD患者CSF中β-內啡肽卻減少。

⑵生長抑素（14肽)：Alzheimer型老年性癡呆患者CSF中生長抑素明顯減少。

⑶腦啡肽：癲癇患者CSF中L-腦啡肽（亮氨酸腦啡肽)顯著增高。

⑷P物質：大多數抑郁癥病人CSF中P物質明顯升高。帕金森病患者CSF中P物質含量一般下降，但病情嚴重時反而明顯增高。

⑸膽囊收縮素（CCK)：精神分裂癥患者CSF中CCK水平下降。

四、基因診斷

由于分子生物學理論和技術的快速發(fā)展，分子生物學方法已成為神經、精神科學研究方法的重要組成部分，被用于神經、精神性疾病的診斷。例如：Goate（1991年)通過PCR方法擴增APP基因，進行核苷酸序列分析，發(fā)現第17外顯子的第2149堿基對位點發(fā)生C→T替換，使蛋白質多肽鏈的第717位點氨基酸發(fā)生Val→Ile，并且突變形成了一個新的限制性內切酶位點，此位點可檢測Alzheimer患者APP基因的突變，作為基因診斷。用假肥大型肌營養(yǎng)不良（DMD)基因的cDNA克隆檢測病人，證實DMD病人中有65％以上有缺失突變，5％有復制性突變，30％沒有基因缺失，后者可利用PCR方法擴增DMD基因內部多態(tài)性位點及DMD基因3’端小衛(wèi)星的DNA（-CACA-)后，再用RFLP分析可檢測出攜帶者以及進行產前診斷。Gusella等人（1983年)從一個噬菌體載體克隆的人類DNA隨機片段中發(fā)現一個與亨迋頓病的缺陷基因位于第四對染色體上，這是人類第一次僅僅應用DNA標志的連鎖分析將一種遺傳病的缺陷基因定位于特定染色體，并應用于臨床診斷。

目前，用基因診斷的神經性疾病有苯丙酮尿癥、亨迋頓病、Alzheimer病、線粒體肌病和腦肌病、遺傳性共濟失調、神經肌肉病、神經纖維瘤病、癲癇、X連鎖智力低下及肝豆狀核變性等，其檢查方法常用分子雜交、RFLP及PCR等技術